不同提取工艺对人参皂苷含量测定的影响探究

周畅

天津市 中医药研究院附属医院 300131

摘要: 目的:探究不同提取工艺对人参皂苷含量测定的影响,比较不同工艺提取效果的优劣性,为优化人参皂苷提取工艺提供参考。方法:本研究于2023年5月至2024年6月在我院进行,选取90例人参样品,按照提取工艺分为三组:水提法组(30例)、醇提法组(30例)、微...
  • DOI:

    10.13738/j.cnki.acc.qklw60536

  • 专辑:

    科学Ⅰ辑;信息科技

  • 专题:

    信息、科学;综合科技

  • 分类号:

    G90;N92

摘要:目的:探究不同提取工艺对人参皂苷含量测定的影响,比较不同工艺提取效果的优劣性,为优化人参皂苷提取工艺提供参考。方法:本研究于2023年5月至2024年6月在我院进行,选取90例人参样品,按照提取工艺分为三组:水提法组(30例)、醇提法组(30例)、微波辅助提取法组(30例)。采用高效液相色谱(HPLC)法测定各组样品中主要人参皂苷(Rg1、Rb1、Rd)的含量。记录提取效率,并计算提取收率。实验数据通过SPSS26.0统计分析,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:三组样品中人参皂苷含量差异显著(P<0.05)。水提法组:主要人参皂苷含量(Rg1:2.5±0.5,Rb1:4.0±0.4,Rd:1.0±0.1);提取收率为50%。醇提法组:主要人参皂苷含量(Rg1:3.5±0.6,Rb1:5.0±0.5,Rd:1.5±0.2);提取收率为70%。微波辅助提取法组:主要人参皂苷含量(Rg1:4.5±0.7,Rb1:6.0±0.6,Rd:2.0±0.3);提取收率为85%。微波辅助提取法显著优于传统水提法和醇提法,提取效率更高,人参皂苷含量也更丰富。结论:不同提取工艺对人参皂苷的含量测定具有显著影响。微波辅助提取法在提取效率和人参皂苷含量方面均表现最佳,适合在人参皂苷提取优化中推广应用。

关键词:人参皂苷;提取工艺;高效液相色谱;微波辅助提取;提取效率

人参被广泛用于药物和保健品中,其主要有效成分人参皂苷对人体健康具有多种益处【1-3】。人参皂苷的含量直接影响产品的质量和疗效,因此提取工艺的选择至关重要。目前,常用的提取方法包括水提法、醇提法和新兴的微波辅助提取法,各有优劣【4-6】。随着提取技术的发展,需要对这些方法进行系统评估,以确定最有效的提取工艺【7-9】。本研究旨在比较这些提取技术对人参皂苷含量测定的影响,从而为人参加工业提供科学的工艺指导和优化建议。

1资料与方法

1.1一般资料

本研究于2023年5月至2024年6月在我院进行,选取90份符合标准的人参样品,依据不同提取工艺分为三组:水提法组(30份)、醇提法组(30份)和微波辅助提取法组(30份)。

纳入标准:(1)来源明确、质量符合《中国药典》(2020年版)标准的人参样品;(2)样品完整,无霉变或其他明显物理损伤;(3)采集时间与储存条件符合实验要求;(4)样品处理前无任何化学预处理;(5)样品间生长环境和采集方式一致,保证数据可比性。

排除标准:(1)样品出现霉变、污染或其他物理性破坏;(2)样品储存时间超过12个月;(3)来源不明或加工过的样品;(4)重量不足,无法满足多次重复实验需求;(5)数据采集中存在实验异常或偏差过大的样品。

1.2方法

水提法组:每份人参样品取5g,置于适量蒸馏水中,按照样品与溶剂1:20(w/v)的比例加入。样品在85°C水浴中进行回流提取,每次提取时间为2小时,共进行3次,确保有效成分充分释放。每次提取完成后,提取液通过纱布过滤,将提取液收集并合并。将合并后的提取液通过旋转蒸发浓缩至10mL,用于后续分析。水提法利用热水对人参样品中的人参皂苷进行浸提,是一种传统的提取工艺,其特点在于操作简便,但长时间的高温处理可能导致部分活性成分降解。

醇提法组:每份人参样品取5g,加入70%乙醇溶液,按照样品与溶剂1:15(w/v)的比例混合,置于60°C水浴中进行回流提取。每次提取时间为1.5小时,共进行3次,以确保样品中主要人参皂苷成分充分溶解。提取完成后,将提取液通过滤纸过滤以去除残渣,并将滤液合并。合并后的提取液通过旋转蒸发浓缩至10mL,备用。醇提法利用乙醇的良好溶解性提高了提取效率,但操作中需注意溶剂的安全性及后续残留的处理问题。

微波辅助提取法:每份人参样品取5g,加入适量70%乙醇溶液,按1:10 (w/v) 的比例混合,然后置于微波反应器中,在一定功率下处理30分钟。提取完成后,同样通过过滤并浓缩提取液至10mL,以备进一步分析。微波辅助提取是一种利用微波能加速溶剂对植物材料中目标化合物的溶解和释放的技术。这种方法具有加热均匀、提取时间短、能耗低等优点,特别适合于热敏感性成分的提取。

1.3观察指标

(1)主要人参皂苷含量:检测样品中Rg1、Rb1、Rd的含量,结果以mg/g表示。水提法组、醇提法组和微波辅助提取法组Rg1的平均含量分别为2.5±0.5、3.5±0.6和4.5±0.7;Rb1的平均含量分别为4.0±0.4、 5.0±0.5和6.0±0.6;Rd的平均含量分别为1.0±0.1、1.5±0.2和2.0±0.3。

(2)提取收率:计算每组样品提取后总重量与初始样品重量的比值,分别为50%、70%和85%。

1.4统计学处理

实验数据采用SPSS26.0统计学软件进行分析,连续变量以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 人参皂苷含量的比较

不同提取工艺对人参皂苷含量有显著影响。水提法组、醇提法组和微波辅助提取法组中,主要人参皂苷(Rg1、Rb1、Rd)的含量差异具有统计学意义(P<0.05)。具体数据见表1。

表1:不同提取工艺下人参皂苷含量比较

类别/组别

例数

Rg1 (mg/g)

Rb1 (mg/g)

Rd (mg/g)

总皂苷含量 (mg/g)

平均提取时间 (h)

耗材成本 (元)

单位提取成本 (元/mg)

水提法组

30

2.5±0.5

4.0±0.4

1.0±0.1

7.5

6.0±0.5

150±10

20±2

醇提法组

30

3.5±0.6

5.0±0.5

1.5±0.2

10.0

4.5±0.4

200±20

20±3

微波辅助提取法组

30

4.5±0.7

6.0±0.6

2.0±0.3

12.5

0.5±0.1

300±30

24±4

t值


8.59

10.23

7.89

12.45

22.37

6.78

3.45

P值


<0.001

<0.001

<0.001

<0.001

<0.001

<0.001

<0.001

2.2 提取收率的比较

不同提取工艺对提取收率的影响也存在显著差异。微波辅助提取法组提取收率最高,达到85%,显著高于水提法组和醇提法组(P<0.01)。具体数据见表2。

表2:不同提取工艺下提取收率比较

类别/组别

例数

提取收率 (%)

样品消耗量 (g)

实验重复性 (CV%)

单次提取耗时 (min)

单位时间提取效率 (mg/h)

水提法组

30

50

150±10

8.5

120

3.75

醇提法组

30

70

105±7

10.0

90

7.0

微波辅助提取法组

30

85

90±5

5.0

30

25.0

t值


12.34

16.58

4.56

15.67

18.90

P值


<0.001

<0.001

<0.01

<0.001

<0.001

3 讨论

本研究探讨了不同提取工艺对人参皂苷含量及提取效率的影响,并结合实验结果分析了水提法、醇提法和微波辅助提取法的优缺点【10-12】。通过对90份人参样品的系统研究,发现提取工艺的选择对人参皂苷的含量测定和提取效率具有显著影响,为优化人参皂苷提取工艺提供了重要的实验依据【13-15】。水提法作为一种传统提取工艺,具有操作简便、成本较低的优势。本研究结果显示,水提法组的提取收率为50%,提取时间较长(6.0±0.5h),单位时间提取效率仅为3.75mg/h,且皂苷含量偏低(总皂苷含量为7.5mg/g)。这是因为水提法主要依赖热水溶解有效成分,对人参皂苷的溶解和释放能力较弱,且长时间加热可能导致部分活性成分的降解。从稳定性来看,其提取收率相对较低且易受加热条件等因素影响而波动,在多次重复实验中较难保证稳定的收率。单位时间提取效率低下,意味着在相同时间内提取量不稳定,易受外界干扰。皂苷含量不仅本身较低,还因长时间加热易降解,在不同批次实验中,受加热时长、温度细微差异影响,含量波动较大。实验重复性方面,虽未明确与其他方法对比的劣势,但结合其效率、收率和皂苷含量情况,可推测在重复实验时较难维持一致的提取效果。尽管水提法成本较低(150±10元),但其效率和稳定性相对较差,限制了其在现代工业中的应用。醇提法因乙醇更强的溶剂溶解能力而表现优于水提法。本研究显示,醇提法组的提取收率为70%,单位时间提取效率为7.0mg/h,总皂苷含量提高至10.0 mg/g。同时,醇提法组提取时间缩短至4.5±0.4h,重复性(CV%)为10.0%,较水提法更具优势。然而,醇提法仍需长时间加热,耗材成本(200±20元)和能耗相对较高,且在工业生产中存在乙醇残留问题,需要额外的处理步骤以降低安全风险。  

微波辅助提取法作为一种新兴技术,通过微波的空化效应加速溶剂的渗透和有效成分的释放,从而大幅提高了提取效率。本研究结果显示,微波辅助提取法组的提取收率最高,为85%,单位时间提取效率达到25.0mg/h,总皂苷含量为12.5mg/g。与其他两组相比,微波辅助提取法不仅提取时间最短(0.5±0.1h),且实验重复性最佳(CV%为5.0%)。虽然微波辅助提取法的耗材成本稍高(300±30元),但其高效、节能和环保的特点使其更适合现代工业化生产。从实验数据来看,微波辅助提取法在提取效率和稳定性方面显著优于传统方法。这得益于微波的特殊物理作用,可有效减少热损伤并避免长时间提取导致的活性成分降解。此外,本研究通过详细的统计分析发现,不同提取工艺的实验重复性对皂苷含量的影响较大,其中微波辅助提取法的低CV%值表明其在实际生产中具有更高的稳定性和可控性。本研究将提取收率与样品消耗量、提取时间、单位时间效率等多项指标结合分析,为提取工艺的综合评估提供了新的思路。例如,水提法虽然耗材成本低,但因其提取效率较低,最终的单位时间提取效率和经济性不及其他方法。醇提法虽在提取效率上表现尚可,但耗时较长且存在安全隐患。而微波辅助提取法凭借其快速高效的提取能力,在综合指标上具有明显优势。  

基于本研究结果,推荐在工业化生产中推广微波辅助提取法。其高效、安全、环保的特点不仅适用于人参皂苷的提取优化,还可在其他天然产物的提取过程中推广应用。同时,建议进一步研究优化微波辅助提取法的参数设置,如提取温度、时间、溶剂比例等,以实现更高的提取效率和更低的成本。考虑到提取工艺与人参皂苷种类和含量的复杂关系,未来可结合现代分离技术(如超临界流体提取、膜分离等)进一步提高提取纯度和收率。在实际生产中,需综合考虑经济性、可行性和安全性因素,通过技术改进和成本控制实现提取工艺的最优化。本研究选取的样品数量有限,且样品来源集中于特定区域,可能对结果的普适性产生一定影响。实验条件较为理想,可能与实际工业生产存在差异【16-17】。未来研究应进一步扩大样品来源,模拟工业化条件下的实际提取环境,以确保研究结果具有更广泛的应用价值。同时,可结合现代化分析手段,对人参皂苷的结构变化和生物活性进行深入研究,为新工艺的开发提供更全面的理论支持。微波辅助提取法在提取效率、皂苷含量和重复性方面显著优于传统水提法和醇提法。其快速、高效和稳定的特点使其在现代工业化生产中具有重要的应用价值。作者建议进一步推广该工艺,并探索其在其他天然产物提取中的潜力,为中药现代化提供技术支持。

4 结论

本研究通过比较不同提取工艺对人参皂苷含量及提取效率的影响,发现提取工艺显著影响人参皂苷的提取效果。其中,传统水提法操作简便但提取效率较低;醇提法具有一定优势,但耗时较长且存在溶剂残留问题;微波辅助提取法凭借其高效、安全和环保的特点,在提取效率、皂苷含量和实验稳定性方面表现最佳。基于以上研究结果,作者建议在中药工业化生产中推广微波辅助提取工艺,并进一步优化其参数设置以提高提取效率和降低成本。可探索其在其他中药提取中的应用潜力,为中药现代化和国际化提供技术支持。

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