18-24小时发放尿细菌培养阴性结果报告的可行性研究

摘要：目的 研究尿细菌培养阴性结果在18-24小时发报告的可行性。为临床一线尽早提供细菌培养结果，制定最佳治疗方案。 方法 收集2016年1月至12月北京和睦家医院清洁中段尿细菌培养标本4908份，接种于Uricult浸片式尿细菌培养基。18-24小时过夜培养后判读结果为阴性的尿培养标本继续培养至48小时，再次进行结果研究尿细菌培养阴性结果在18-24小时发报告的可行性。判读后分析尿细菌培养阴性结果在18-24小时发报告的必要条件。然后采用1983份清洁中段尿细菌培养标本对上述条件进行验证。结果 4908份清洁中段尿培养标本经过18-24小时过夜培养后，461份（9.4%）尿培养标本为有临床意义细菌生长；4447份尿培养标本为无临床意义细菌生长或无菌生长的阴性结果。4447份阴性结果标本继续培养至48小时后，当去除实际判读时标本过夜培养时间不足18小时（5pm之后接收的标本）、ICU患者标本、使用过抗生素或怀疑有真菌感染的患者标本时，只有6份（0.13%）尿细菌培养标本在48小时长出“有临床意义”的细菌。结合病例分析显示这6份在48小时后转成阳性的尿细菌培养结果并未影响临床诊疗方案。用于验证的1983份尿细菌培养结果表明，满足上述条件后，18-24小时尿培养结果为阴性的1711份标本继续培养到48小时后未出现转阳标本。结论 满足一定条件（去除ICU 患者标本、使用过抗生素或怀疑有真菌感染的患者标本）下的清洁中段尿培养标本经过18-24小时培养后，如果结果判读为阴性即可发放报告。

关键词：尿培养; 尿路感染; 细菌培养; 孵育时间

尿路感染是由病原微生物导致的泌尿系统各个部位的感染，通常由细菌引起，其中最常见的病原菌为革兰氏阴性菌，大肠杆菌占比在50%以上[1] [2] [3]。尿细菌培养是诊断尿路感染的金标准，也是临床微生物实验室最常见的细菌培养之一。临床医生及时获得准确的培养结果，在病人的诊断、治疗以及规范使用抗生素等方面均具有重要的临床意义[4]]。目前国内临床实验室普遍要求所有尿培养标本应孵育48小时后才能发放最终的阴性结果。本文主要探讨尿细菌培养阴性结果在初次过夜培养18-24小时后发报告的可行性，以满足临床诊疗需求。

资料与方法

一、材料

标本来源：

选取2016年1月至2017年6月北京和睦家医院就诊患者和产前筛查孕妇的6891份清洁中段尿培养标本。其中，2016年1月至12月4908份尿培养标本用于研究尿细菌培养标本经18-24小时初次过夜培养后阴性结果发报告的前提筛查条件。2017年1月至6月1983份尿培养标本用于验证在满足筛查条件下，过夜培养18-24小时尿培养阴性结果发报告的可行性。

仪器与试剂：

Uricult浸片式尿细菌培养基（芬兰Orion Diagnostica 公司）和二氧化碳细菌培养箱（美国精密科学公司 NAPCO2 5420-1）。

二、方法

（一）尿细菌培养接种方法

将Uricult浸片式尿培养基完全浸入新鲜收集的混匀尿液标本中，或将混匀尿标本倒在培养基上，使培养基完全被浸润。随后将培养基上多余的尿标本弃掉。将培养基放回贴好病人标签的培养管内，旋紧瓶盖。

（二）培养条件：将完成接种的Uricult浸片培养基直立放置于35-37摄氏度细菌培养专用孵育箱内进行培养。

（三）尿细菌培养结果的判读及记录

根据《临床微生物检验标准化操作第3版》及《Manual of Clinical microbiology, 11th edition》进行两次结果判读。判读标准见表1。

表1 清洁中段尿细菌培养结果判读标准

（四）统计学处理

使用EXCEL 2016版电子表格及实验室信息系统，对数据进行汇总。分类统计分析计算出初次过夜18-24小时尿培养阴性结果放置到48小时转为阳性的数量和占比。

结果

一、2016年1月至2016年12月间，4908份尿培养标本初次过夜培养后，461份（9.4%）标本结果判定为“有临床意义细菌生长”；431份（8.8%）标本结果判定为“无临床意义细菌生长”；4016份标本 （81.8%）结果判定为无细菌生长。见表2。

表2 4908份尿培养18-24小时初次判读结果

将初次过夜培养判读结果为“无临床意义”（431份）和“无细菌生长”(4016份)的尿培养标本（共计4447份）继续放置到48小时后再次进行判读：431份无临床意义尿培养标本判读结果仍为“无临床意义”。4016份初次判读结果为“无细菌生长”的标本中，3479份标本仍为“无细菌生长”；494份标本判读结果为“无临床意义细菌生长”；43份标本在48小时判读为“有临床意义”细菌生长，占比不到1%（43/4447）。

二、对于43份在48小时由阴性转成阳性的标本仔细分析。发现其中19份标本的接收时间在第一日5pm之后，实际过夜培养时间在3至15.5小时不等，真正培养时间不足18小时；8份标本为酵母菌生长；10份样本来源于ICU患者，在尿培养留样前患者已经使用抗生素；剩余6份（0.13%，6/4447）标本初次过夜培养后判读为阴性，再继续孵育至48小时，长出“有临床意义”的细菌，见表3。 

表3 孵育48小时判读结果转为 “有临床意义”细菌生长的43份样本分布

进一步对这6份初次过夜培养（18-24小时）无细菌生长，而继续孵育到48小时，生长出“有临床意义”细菌的样本从临床病史、诊断以及抗生素的使用情况来逐一进行分析，见表4。

表4  6份48小时 阴转阳“有临床意义”细菌生长的临床分析

从表4中可以看出，占分析总数0.13%的6份标本中有3份为孕妇无症状菌尿，未经治疗自愈。另外3份，在培养结果出来前临床已经根据症状及尿常规检查结果启动经验性抗生素治疗，阳性培养结果对于最终诊疗无影响。 

三、1983份 尿培养标本验证结果

2017年1月至6月1983份清洁中段尿培养标本，其中18份ICU标本和3份怀疑真菌感染标本需继续培养至48小时，予以去除。 剩余1962份尿培养标本经过18-24小时初次过夜培养判读结果为“有临床意义”的阳性结果251份；阴性结果1711份，其中“无临床意义”384份；“无细菌生长” 1327份。将初次判读为阴性的1711份尿培养标本放置48小时再次读取结果，384例“无临床意义”的标本结果仍为“无临床意义”。 1327份初次判读结果转为“无细菌生长”的标本中，154份标本结果为“无临床意义细菌生长”，其余1173份标本仍无细菌生长。

讨论

本研究显示，4447份清洁中段尿培养标本初次过夜培养为阴性结果。其中，只有43例尿标本放置到48小时后有“有临床意义”细菌生长，假阴性率不足1% （43/4447）。当去除标本培养时间不足（5pm之后接收的标本）18小时、ICU 患者标本或用过抗生素或怀疑有真菌感染的患者标本时，只有6份（约千分之一）尿培养标本在18-24小时后发放阴性结果时会被漏检。而这6份标本中有3份标本，医生给患者开具尿细菌培养申请的同时，已经结合病人临床体征、尿常规分析结果做出了泌尿系感染的经验性诊断，并随即开始了抗生素治疗方案。 还有3份标本，患者就诊时，临床并未诊断泌尿系感染，为妊娠期无症状菌尿。随后尿细菌培养结果完成后，医生也并未修改临床诊断以及尝试抗生素治疗。也就是说这6份在48小时后出现阳性结果的尿培养，均未影响临床诊疗方案。 验证数据结果也证实，当去除ICU患者标本、用过抗生素或怀疑有真菌感染的患者标本时，经过18-24小时过夜培养后发阴性结果没有造成假阴性结果。

基于以上分析，笔者认为，当清洁中段尿培养标本满足一定条件，即去除ICU患者标本、使用过抗生素或怀疑有真菌感染的患者标本后，只需要将中段尿标本过夜培养18-24小时后即可对结果进行判读。

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