不育男性精浆弹性蛋白酶水平与精液主要参数及精子DNA完整性的关系分析

【摘要】目的：分析不育男性精浆弹性蛋白酶（Seminal plasma elastase，SPE）水平与精子浓度、前向运动精子（progressive，PR）百分率、正常形态精子率、精子DNA碎片率（DNA fragment index，DFI）等精液主要参数的关系，并分析其与精子DNA完整性的关系。方法：选取我院男性生殖科在2024年3月-5月期间临床收治的不育男性76例为研究对象，根据SPE水平将其分为SPE正常组（n=43）与SPE异常组（n=33），比较患者的精液主要参数及精子DNA完整性，经Pearson检验分析不育男性SPE与精液常规参数及精子DNA完整性的相关性。结果：比较SPE正常组与SPE异常组的年龄、精子浓度及正常形态精子率，无显著差异（P＞0.05）；SPE异常组患者的PR%低于SPE正常组，DFI值高于SPE正常组（P＜0.05）。经Pearson检验分析，不育男性SPE与精子浓度及正常形态精子率无相关性（r=0.036，0.065，-0.508，P＞0.05）；不育患者SPE与PR%呈负相关性，不育患者SPE与DFI呈正相关性（r=-0.468，0.752，P＜0.05）。结论：不育男性患者SPE呈现高表达特点，SPE水平异常对精子活力、精子DNA完整性的影响显著，且与PR%运动精子百分率、DFI呈高度相关关系。因此，精液常规检测时，可纳入SPE、PR%、DFI指标分析，有利于提高男性不育症的诊治效果。

【关键词】不育男性；精浆弹性蛋白酶水平；精液主要参数；精子DNA完整性

男性不育是一种常见的生殖健康问题，主要指男性在正常性生活条件下无法使女性受孕，影响着许多夫妻的和谐生活。精液是男性生殖系统产生的重要生物液体，其中包含了精子、蛋白质、激素等成分[1]。精子质量和功能对于成功的受孕非常关键，而精液中的精子浓度、PR及正常形态精子百分率等各项参数均可以作为评估男性生育能力的指标。精液弹性蛋白酶（Seminal plasma elastase，SPE）是一种酶类物质，参与了精浆的凝固和液化过程，往往会影响精子的运动能力和功能[2]。精子DNA完整性是评估男性生育能力的重要指标之一，反映了精子染色体的结构和稳定性，对于正常受精和胚胎发育至关重要。如精子DNA结构损伤或碎裂，其受精能力和胚胎发育潜力可能会受到影响[3]。因此，研究精液中弹性蛋白酶的水平与主要参数及精子DNA完整性的关系，有助于揭示不育男性的生殖障碍机制，并为男性不育的临床诊断和治疗新的思路和方法，可帮助不育夫妇实现健康生育的愿望。本研究选取我院男性生殖科在2024年3月-5月期间临床收治的不育男性76例为研究对象，旨在分析SPE水平与精液主要参数及精子DNA完整性的关系。现报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

本研究选取我院男性生殖科在2024年3月-5月期间临床收治的不育男性76例为研究对象。纳入标准：①性生活正常，同居≥1年，未避孕而未育；②无生殖器外伤或无睾丸、附睾、输精管异常；②性功能障碍或输卵管异常；③内分泌疾病或系统性疾病；④家族性遗传病史；⑤具备知情同意条件。排除标准：①性激素异常者；②无精症；③合并其他严重系统疾病；④资料缺失者。年龄范围24-57岁，平均年龄（33.34±6.79）岁，病程2~12年，平均病程（7.88±2.15）年。根据SPE水平将其分为SPE正常组（SPE 1000ng/mL，n=43）与SPE异常组（SPE≥600ng/mL，n=33）。

1.2方法

1.2.1SPE水平检测

离心液化好的精液，取精浆，采用酶联免疫吸附法测定SPE 水平，使用全自动生化分析仪检测，由南京欣迪生物提供试剂，正常参考范围0-1.00U/L。严格按试剂盒操作说明书进行操作。

1.2.2精液主要参数检测

待精液完全液化后，采用计算机辅助精液分析系统分析精子浓度及前向运动精子（progressive，PR）百分率。制备精子涂片，采用迪夫快速染色法，1000×油镜观察并计算正常形态精子百分率=正常形态精子数/计数精子总数×100%。精子浓度、PR及正常形态精子百分率的对应参考值下限为15×106/mL、32%、4%。

1.2.3DNA完整性检测

按操作说明书应用精子染色质结构分析（SCSA）试剂盒（浙江星博公司）处理样品，分别采用流式细胞仪（美国BD公司）、SCSA检测细胞标记荧光信号、精子DNA碎片。发绿色荧光表示精子DNA完整，发黄色或红色荧光代表精子DNA呈碎片化。

1.3观察指标

比较两组患者的精液主要参数及精子DNA完整性，另采用Pearson相关性分析不育男性SPE与精液常规参数（精子浓度、PR%、正常形态精子率）及精子DNA完整性的相关性。

1.4统计学分析

数据分析软件选取SPSS27.0，计量资料依托（`x±s）表述，经由t检验，相关分析采用Pearson相关性分析，P<0.05表明差异存在显著意义。

2.结果   

2.1两组患者的精液主要参数及精子DNA完整性比较

比较SPE正常组与SPE异常组的年龄、精子浓度及正常形态精子率，差异无显著差异（P＞0.05）；SPE异常组患者的PR%低于SPE正常组，DFI值高于SPE正常组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组患者的精液主要参数及精子DNA完整性比较（`x±s）

2.2不育男性SPE与精液常规参数及精子DNA完整性的相关性分析

经Pearson检验分析，不育男性SPE与精子浓度及正常形态精子率无相关性（P＞0.05）；不育患者SPE与PR%呈负相关性，不育患者SPE与DFI呈正相关性（P＜0.05）。见表2。

表2不育男性SPE与精液常规参数及及精子DNA完整性的相关性分析

3.讨论

男性不育以生殖道炎症为常见致病因，弹性蛋白酶主要由中性粒细胞、巨噬细胞和某些特定的细菌产生，具有弹性和韧性，可通过降解和分解弹性蛋白纤维，参与组织修复和再生过程[4]。SPE是生殖道炎症定量指标之一，敏感性较高，通过检测SPE水平，有利于筛选隐匿性炎症，帮助医生判断是否存在前列腺炎症状以及炎症程度，有助于诊断和治疗决策。在男性生殖系统中，SPE水平与精液液化过程密切相关[5]。SPE水平与精子浓度、精子活动率、PR%、正常形态精子百分率等多种精液参数有关。其中，精子浓度越高，代表着精液中所含有的精子数量越多。精子活动率高表示精子具有较好的运动能力，能够更快地游向卵子。可见，精子浓度率和精子活动率可增加受孕的机会。PR和正常形态精子均是评估精子质量和功能的常用指标，百分率越高则受孕的机会越大。

在本研究中，比较SPE正常组与SPE异常组的年龄、精子浓度及正常形态精子率，无显著差异（P＞0.05）。经Pearson检验分析，不育男性SPE与年龄、精子浓度及正常形态精子率无常规性（P＞0.05）。提示，年龄、精子浓度及正常形态精子对不育男性患者的SPE水平无影响，不存在相关性。SPE异常组患者的PR%（40.25±13.53）%低于SPE正常组（24.94±11.31）%，DFI值（14.59±9.11）%高于SPE正常组（27.24±17.71）%，差异具统计学意义（P＜0.05）。提示，精液主要参数仅有SPE与PR%存在差异。主要是因男性生殖道感染或炎症发生时，患者的精子质量及精子活性、运动能力均会受到不同程度的影响，常表现为PR及正常形态的精子数量降低等特点。精子DNA的遗传信息的主要载体，DFI指标常用于评价精液质量及精子DNA损伤程度，可反映精子DNA的完整性，一是结构完整性，二是功能完整性。并对男性生殖能力进行准确诊断[6-7]。当精子DNA损伤＞30%时，精液中DNA碎片率会显著增加，因此，DFI水平异常升高往往意味着男性的生育能力明显降低。随着DFI的增高，精子DNA损伤越严重，DNA碎片数量随之增多，从而减弱精子活力，使PR%显著减少，同时，DFI值增多会降低精子正常形态率。经Pearson检验分析，不育男性患者的SPE与PR%呈负相关性，但与DFI呈正相关性（r=-0.468，0.752，P＜0.05）。提示，不育男性患者SPE异常高表达可降低PR%，同时对DFI具有提高作用，据此可有效判断男性不育。分析与不育男性患者的SPE表达水平往往会影响精子活力以及精子DNA完整性有关。SPE是一种与精子活力密切相关的蛋白质。精子活力是指精子的游动能力和活动力，对于成功受孕至关重要。研究发现[8]，SPE在精子的运动过程中发挥着重要作用，参与调控精子的运动能力和速度。因此，不育男性患者中SPE表达水平的异常，可能导致PR%减少，精子活力下降，从而影响受孕能力。精子DNA完整性是指精子染色体的结构完整性和遗传信息的稳定性。精子DNA的损伤或断裂会导致精子的功能异常，从而影响受精和胚胎发育。研究表明[9]，SPE在维持精子DNA完整性方面扮演着重要角色。SPE可以保护精子DNA免受氧化应激和其他损伤因素的影响，减少精子DNA的断裂和损伤。因此，不育男性患者中SPE表达水平的异常，可能导致精子DNA碎片率增加，同时可导致不正常的受精和胚胎发育增多[10]。

综上所述，不育男性SPE与年龄、精子浓度及正常形态精子率无相关性。但不育男性患者SPE呈现高表达特点，SPE水平异常往往会影响精子活力、精子DNA完整性，且与PR%、DFI呈高度相关关系。因此，临床对不育男性的精液进行常规检测时，可纳入SPE、PR%、DFI指标分析，对男性不育症的诊治效果具有改善作用。

参考文献

[1] 邓浩,李小琴,朱倩怡,等.精浆弹性硬蛋白酶水平对男性生殖道感染引起不育症的诊断价值[J].深圳中西医结合杂志,2021,31(15):93-94.

[2] 张振刚,张永田,李晓娜,等.精浆弹性蛋白酶对精浆锌及男性不育症的影响[J].西部医学,2019,31(02):213-215+220.

[3] 朱晋德,余怡,李豫,等.男性不育患者精浆弹性蛋白酶与精子活性氧及精液参数的相关性研究[J].中华男科学杂志,2022,28(3):223-226.

[4] 袁静茹.精浆弹性蛋白酶、精子DNA损伤与精液常规参数的相关性研究[D]. 广州医科大学,2019.

[5] 常琰.男性不育患者精子质量与精浆弹性蛋白酶的相关性分析[J].中国医药指南,2019,17(27):159-160.

[6] 周广义,吕慧杰,张花锦,等.精浆弹性蛋白酶、精液白细胞浓度、精子活性氧和精子DNA碎片指数间的相关性分析[J].中国校医,2023,37(10):786-789.

[7] 兰贵斌,余飞,黄承乐,等.不育患者精浆弹性蛋白酶、精子DNA碎片指数与精液常规参数的相关性研究[J].航空航天医学杂志,2023,34(01):1-4.

[8] 郑慧澜,袁启龙,何君伟,等.不育男性精浆弹性蛋白酶水平与精液主要参数及精子DNA完整性的关系分析[J].热带医学杂志,2019,19(2):145-147,169.

[9] 谭姿辉,翟志瑾,张硕,等.精浆弹性蛋白酶与男性不育症精子DNA完整性和精子质量的相关性分析[J].中国性科学,2023,32(6):24-28.

[10] 郭乐乐,吕大娇,李荣香,等.精浆弹性蛋白酶水平与精液参数、精子DNA完整性的相关性分析[J].中国医学工程,2023,31(06):118-121.