呼吸道病毒检测在亚急性咳嗽患者中的应用价值分析

【摘要】目的：探讨呼吸道病毒检测在亚急性咳嗽患者中的应用价值。方法：收集2024年6月1日-2025年5月31日，入我院就诊的亚急性咳嗽、胸片正常病患80例为研究对象，为其实施呼出气一氧化氮检测（FeNO）、肺功能、气道敏感性检测，择取敏感性检测阴性研究对象，进行诱导痰采集。通过PCR检测确认诱导痰中的呼吸道病毒，将病毒阳性患者分别与NAEB组、其他病因组进行临床指标的对照分析。结果：本次80例纳入对象中，试验阳性30例，试验阴性50例。50例阴性者实施诱导痰处理，失败10例，成功40例。80例患者FeNO检测结果中，感染后咳嗽45例，咳嗽性哮喘20例，NAEB10例，上气道咳嗽综合征3例，其他2例。选取40份诱导痰标本开展呼吸道病毒PCR测定，其中阳性25份，鼻病毒阳性15例，其中腺病毒阳性5例，甲型流感病毒阳性4例，人偏肺病毒阳性1例，本研究中所有标本的肺炎支原体核酸检测结果均提示阴性。结论：采用PCR检测诱导痰标本，进一步明确亚急性咳嗽人群的呼吸道病毒感染情况。而单一采用诱导痰细胞分型与FeNO检测这两项手段，则有可能导致NAEB的过度诊断。

【关键词】呼吸道病毒检测；亚急性咳嗽；支气管感染

在呼吸科门诊的日常诊疗工作中，亚急性咳嗽是一类极为常见的主诉症状，其病因繁杂多样，无法在短期内有效确认病症信息。经研究可知，上呼吸道感染继发亚急性咳嗽群体中，部分患者存在嗜酸性粒细胞炎症，下辖CVA与NAEB两种分型[1]。既往针对感染咳嗽研究内容，主要以临床诊断为评估标准，国内外针对亚急性咳嗽人群呼吸道病毒感染情况及病毒分型的系统性研究仍较为欠缺。基于此，本研究采用PCR技术，检测亚急性咳嗽患者诱导痰标本中的呼吸道病毒载量及分型，致力于探究该检测手段在亚急性咳嗽病因精准诊断中的临床实用价值，为临床诊疗提供参考依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

2024年6月1日-2025年5月31日，入我院就诊的亚急性咳嗽、胸片正常病患80例为研究对象，男41例，女39例，年龄20-65（均值45.71±10.49）岁。入组标准：符合《咳嗽的诊断与治疗指南》[2]相关诊断标准；胸部CT/胸部X线检查无明显异常；本研究方案经伦理委员会批准，自愿签署知情同意文件。排除标准：ACEI 类药物用药史；24h内吸入/口服糖皮质激素、白三烯受体拮抗剂等药物；伴有慢性呼吸系统疾病史或肝肾功能异常。

1.2 方法

支气管激发试验前，使用一氧化氮检测器完成FeNO测定。嘱受试者保持端坐体位，缓慢吸气直至达到个人最大肺活量值，维持50ml/s的呼气流速并保持匀速状态10s，待系统提示完成检测，直至检测系统发出完成指令。

采用肺功能检测仪确认肺功能变化，予醋甲胆碱行气道激发试验，逐步调整给药浓度。试验过程动态监测FEV1，若FEV1较基础值下滑超过20%，则终止试验；若5次浓度吸入后，水平下降仍不足20%，则判定为气道激发试验阴性。

试验阴性者再次留取诱导痰，患者需休息1h复检，内容如下：诱导痰采集前10min，嘱患者吸入400μg硫酸沙丁胺醇溶液雾化10min后，嘱患者清洁口腔并擤尽鼻腔分泌物，若痰液产出量较少，可多次重复雾化流程，雾化总时长达到30min时停止。痰液咳出后进行处理，以无菌镊子选取不透明痰块，取4倍体积0.1%二硫苏糖醇混匀，振荡过滤后常温离心（2500r/min，10 min），取适量沉淀细胞，采用磷酸盐缓冲液（PBS）重悬备用取制备好的细胞悬液制作涂片，HE 染色后开展细胞分类计数操作。剩余沉淀细胞及上清液 - 80℃冻存，待检病毒与支原体。

本研究所用呼吸道病毒核酸多重联检试剂盒及肺炎支原体核酸实时荧光 PCR 检测试剂盒；检测范围：流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、肺炎支原体等。采用DNA/RNA 提取试剂盒提取诱导痰核酸，严格遵循各试剂盒说明书操作流程，最终进行实时荧光定量仪开展核酸扩增与检测。

1.3 统计学处理

本研究的实验数据采用SPSS24.0统计软件对其进行分析处理，组间横向分析与组内纵向分析，分别采用t检验法及一般线性模型重复测量的方差分析法，计量数据以（±S）表示，当P＜0.05认为有统计学意义。

2 结果

2.1 病因分析

本次80例纳入对象中，试验阳性30例，试验阴性50例。50例阴性者实施诱导痰处理，失败10例，成功40例。

80例患者FeNO检测结果中，感染后咳嗽45例，咳嗽性哮喘20例，NAEB10例，上气道咳嗽综合征3例，其他2例。

2.2 呼吸道病毒PCR测定

选取40份诱导痰标本开展呼吸道病毒PCR测定，其中阳性25份，鼻病毒阳性15例，腺病毒阳性5例，甲型流感病毒阳性4例，人偏肺病毒阳性1例，本研究中所有标本的肺炎支原体核酸检测结果均提示阴性。

表1 呼吸道病毒PCR测定[n（%）]

3 讨论

亚急性咳嗽在临床上较为多见，其病程介于3-8周，症状迁延难愈，对患者生活质量影响较大。病因以胃食管反流、变应性哮喘、变应性鼻炎以及上呼吸道病毒感染等为主，其中感染后咳嗽为首要诱因。研究表明，部分患者发病期可能存在继发性感染咳嗽，其中呼吸道病毒感染是核心病因，病毒感染所致的气道炎性反应，或为其核心致病机制[3]。依照诱导痰细胞学检测结果可知，病毒感染与NAEB引发气道炎症的细胞浸润特征不同，可通过细胞学指标区分二者，为避免NAEB过度诊断提供依据。变应原吸入、职业暴露是NAEB的重要诱因，其典型病理特征为中心气道的嗜酸性粒细胞性炎症；而呼吸道病毒感染气道上皮细胞，会引发黏膜淋巴细胞浸润、亚型改变及嗜酸性粒细胞浸润。病毒感染的相关研究数据显示，成人哮喘患者感染后血清IgE水平及嗜酸性粒细胞计数均会升高，此结果表明单纯凭借诱导痰嗜酸性粒细胞占比诊断NAEB，极易造成该疾病的过度诊断。

本研究显示，80例患者FeNO检测结果中，感染后咳嗽45例，咳嗽性哮喘20例，NAEB10例，上气道咳嗽综合征3例，其他2例。选取40份诱导痰标本开展呼吸道病毒PCR测定，其中阳性25份，鼻病毒阳性15例，其中腺病毒阳性5例，甲型流感病毒阳性4例，人偏肺病毒阳性1例，本研究中所有标本的肺炎支原体核酸检测结果均提示阴性。不同类型呼吸道病毒对FeNO水平及气道嗜酸性粒细胞的影响存在明显异质性，单纯依靠这两项指标进行诊断，可能会使部分病毒相关性感染后咳嗽被误判为NAEB。

综上，亚急性咳嗽患者行呼吸道病毒PCR检测，可提升病毒检出率，助力感染后咳嗽精准诊断，进而减少NAEB的过度诊断情况。

【参考文献】

[1]陆金花,陈茹,陆静婵,陆爱玲,廖逍翎,胡国平,黄陆颖.呼出气一氧化氮联合小气道功能指标检测对咳嗽变异性哮喘的诊断价值[J].中国临床新医学,2025,18(01):12-17.

[2]赵苗苗,陈露萍,杨轶童,马文娟,孙媛,孙珠君,石曌玲.FeNO和TIgE及外周血EOS计数联合检测对儿童2型气道炎症相关咳嗽变异性哮喘的诊断价值[J].中国妇幼健康研究,2024,35(11):76-84.

[3]杨晓芳,王欣.呼吸道病毒检测在亚急性咳嗽患者中的应用效果分析[J].国际感染病学,2020,9(02):287-288.