自制肿瘤标志物液体质控品的性能评价

摘要：目的 探讨自制部分肿瘤标志物的制备方法及其性能评价。方法 筛选出符合要求的患者和健康体检者的血清，经过过滤、灭活、离心等一系列步骤，于-70℃冰箱保存，分别对保存一月、三月、六月的肿瘤标志物AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、TPSA、FPSA这七项肿瘤标志物液体质控品进行性能评价，同时和商品质控品作对比，经统计得出结论。结果 自制液体质控品6个月之内稳定性符合要求，均值和批内变异系数均符合要求，可以代替商业质控品用于实验室室内质控。

关键词：肿瘤标志物，自制质控品，性能评价

中图分类号：R73

近年来，我国癌症发病率持续上升，严重威胁居民身体健康。面对严峻的癌症防控形势，早期诊断和早期治疗成为降低癌症死亡率的关键环节，有助于提高癌症治愈率，减轻社会医疗负担，是国家健康战略需求的重要部分。肿瘤标志物是指在肿瘤发生、发展、转移等过程中，由肿瘤细胞自身或是因机体对肿瘤反应从而产生的与肿瘤相关的分子或物质。这些物质能够在体液（如血液、尿液、唾液等）或者肿瘤组织中被检测到，包括基因和遗传标志物、蛋白质、激素、酶、代谢物等，并且与肿瘤的发生、分期、预后和治疗反应等具有一定的关联性。因此，针对肿瘤标志物的研究具有广泛的科学价值和临床意义。一方面，它能够推动肿瘤生物学的深入理解，揭示肿瘤发生和进展的分子机制，为发现新型潜在治疗靶点提供理论依据。另一方面，肿瘤标志物能够为癌症早期筛查和诊断、预后和疗效监测等方面提供重要依据。例如，肿瘤标志物能够在肿瘤发展的早期阶段通过血液、尿液或其他体液检测出异常，帮助实现早期筛查和早期诊断。鉴于肿瘤患者存在显著的个体差异，肿瘤标志物可作为现有技术的补充，帮助更加精确地评估患者的肿瘤分期、肿瘤负荷和预后风险。肿瘤标志物在治疗过程中进行动态监测有助于评估治疗反应以及监测肿瘤的复发或转移，进而评估患者的生存期和疾病进展，从而为个体化治疗方案的制定提供重要基础。因此肿瘤标志物的检测质量尤为重要，可靠且稳定的肿瘤标志物质控品是确保肿瘤标志物检测质量的重要保证，室内质控是实验室质量管理中的重要环节，是实验室为了监测和评价其工作质量而采取的检查、控制手段。而室内质控能发挥其作用有一个前提：室内质控品质量必须合格！如今各医院基本都会选择商业质控品，商业质控品具有复合度高、效期长、无需花费时间和精力制备等优点，但有少许项目难以购买到商品质控品或商品质控品某些特性如基质效应、价格、浓度水平等不满足实验室要求，比如肿瘤标志物，虽然可以购买到商品质控品，但价格昂贵，且基质效应会影响质控结果。考虑到及时离心后血清中肿瘤标志物较稳定，4℃冰箱可以稳定24h，-70℃可以稳定12个月以上，因此我根据本实验室检测肿瘤标志物项目情况，自制了肿瘤标志物液体质控品，通过一系列检测与计算，对其性能进行了评价。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

A2000安图全自动免疫分析仪及配套试剂；朗道肿瘤标志物质控品。

1.2 质控品的制备

（1）基质的制备  在日常工作中挑选出无溶血、黄疸、脂血，人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）特异性抗体、乙型肝炎表面抗原阴性的正常体检人员的血清和肿瘤标志物高值血清，37℃水浴箱温浴1～3h，3500rpm离心10min除去血浆中的纤维蛋白原，0.22μm孔径的硝酸纤维素薄膜进行过滤，56℃加热30min灭活备用。取适量肿瘤标志物高值病人血清加入血清基质，调配成合适浓度，充分混匀后，用无菌容器分装成单支于-70℃保存。

（2）确保检测系统的性能符合要求  A2000安图全自动免疫分析仪及配套试剂定期校准证书在有效期内，近期未有更换部件、水质超标等需要对仪器进行重新校准的事件发生，查看相关参数均合格（不合格需要查因校准），在合适的室温及湿度条件下对仪器进行全面维护保养后，对肿瘤标志物项目试剂进行定标，定标系数达到0.999以上，再使用朗道质控品进行室内质控，结果在控后进行下一步工作。

（3)随机抽取10瓶自制质控品，充分溶解混匀后，当日连续检测10次（中间再做一次朗道质控品，结果在控），得到本室最佳条件均值和批内最佳条件变异（OCV），见表1。

表1  自制质控品7项肿瘤标志物检测均值和批内OCV值

(4)稳定性评价分别于第一月、三月、六月随机抽取5支自制质控品37℃水浴箱复溶，充分混匀后当日连续检测5次，得到3个时间段的均值和标准差。

2 结果

2.1 一般性状

本研究自制质控品溶解后为淡黄色透明液体，无杂质。

2.2 瓶间均匀性

本研究自制质控品7个项目的均值与批内变异系数见表1，其中AFP、CEA、TPSA、FPSA为广西临床检验互认项目，达到了广西临床检验互认项目的质量标准。经t检验进行差异分析，P>0.05,组间结果差异无统计学意义，表明瓶间均匀性符合要求。

2.3 稳定性

本研究自制质控品的第一、三、六月结果见表2，三个时间段结果比较无显著差异（P>0.05），表明稳定性符合要求。

表2  本研究自制肿瘤标志物质控品第一,三,六月结果比较

3 结论

《“健康中国２０３０”规划纲要》中提出，要完善癌症防治体系，强化癌症筛查和早诊早治能力，提升规范诊疗水平。肿瘤标志物的研究为肿瘤的早期筛查、精准诊断、疗效监测和预后评估提供了重要工具，是实现肿瘤精准医学的核心支柱之一，肿瘤标志物的检测质量的提高有助于提升癌症患者的生存率，降低癌症治疗的社会负担，提高医疗服务的可及性。

实验室室内质控（interalqualitycontrol‚IQC）是实验室质量管理体系中的一个重要环节‚做好室内质控是确保肿瘤标志物检测质量的重要保证。室内质控品是开展室内质控工作的物质前提‚其性能评价包括一般性状、瓶间差异、稳定性等‚‚根据物理性状分类‚质控品主要有冻干质控品和液体质控品，液体质控品不需特殊设备，避免了冻干质控品溶解液基质效应、瓶间差、加样人员误差以及加样器具误差等缺点。本次研究在日常工作中挑选出肿瘤标志物高值异常值血清‚再从体检人员中挑选出肿瘤标志物正常值的血清,且肿瘤标志物高值和正常值血清无脂血、溶血，传染性检测项目人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体、丙型肝炎病毒（HCV）抗体、梅毒螺旋体（TP）特异性抗体、乙型肝炎表面抗原检测结果均为阴性，用正常体检人员血清将肿瘤高值血清调整至合适浓度，很大程度上规避了质控品的传染性，节省了检测的制备成本，经精密分装‚自制了液体肿瘤标志物质控品‚该液体质控品溶解后外观为澄清透明液体。

如今全国都在实行省内及县内检验结果互认，作为县级检验质量中心的一员，2024年9月份对桂林市全州县各个乡镇卫生院和县级三家医院的检验科的基本现状和质量控制等工作进行了全面检查，室内质控不符合要求的主要是室内质控次数过少甚至无，究其原因，皆因商品质控品价格昂贵，而本身实验室标本量少。这个问题是否可以通过自制质控品得以部分解决，此篇论文希望能抛转引玉，在人力和物力等各方面条件允许的情况下进行部分项目的质控品自制，分发给各乡镇卫生院，要求及时做好室内质控，再统一进行数据分析和监管，逐步实现县级检验结果互认。

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作者简介：石秀（1985—），女，汉族，广西桂林人，大学本科学历，副主任技师，研究方向为自质质控品。