液基细胞学联合HPV检测在宫颈癌筛查中的临床应用价值

摘要：目的：探讨多重PCR技术应用于宫颈细胞学标本和HPV分型检测的适用性和检测速度。方法：对2025年TCT液基细胞学的548个宫颈标本样本资料完整的进行回顾分析，其中HPV520例中阳性119例（22.9%）；同时运用多重PCR技术对高危型以及低危型HPV感染进行检测，获取Ct值判断是否为阳性，与传统的培养法及单型PCR检测方法比较阳性率、检测时间、多型感染检出率等指标，用SPSS26.0软件对t检验及卡方检验结果进行比较，P＜0.05认为差异具有统计意义。结果：HPV检测结果显示，多重PCR阳性119人（22.9%），其中高危亚型阳性82人（15.8%），低危亚型阳性37人（7.1%），多型感染32人（6.2%）。联合TCT检查后，宫颈病变检出率显著提高，多型感染检测阳性率明显高于单型检测（6.2% vs 2.3%，P＜0.05）。 结论：TCT联合HPV检测在宫颈癌筛查中具有灵敏度高、特异性强的优点，可有效提高宫颈病变的早期检出率，多重PCR技术应用于HPV分型检测可准确识别多型感染，为临床诊断和治疗提供可靠依据，值得临床推广运用。

关键词：液基细胞学；HPV检测；宫颈癌筛查；高危型HPV；联合检测

1 资料与方法

1.1 研究对象

回顾性分析2025年在我院开展液基细胞学检查（TCT）的548例宫颈标本，所有标本均行TCT检查，其中520例同时行HPV检测，阳性119例，约占检测总数的22.9％。入组条件是:①患者年龄在20-65岁之间；②既往无宫颈癌手术或者放射、化学疗法的历史；③标本质量满足液基细胞学和HPV检查的要求。剔除标准有：①标本数量不够或者采集过程中出现问题使无法进行检查；②合并有严重的免疫缺乏或者病毒感染；③曾经接受过有关宫颈疾病的治疗。样本的质量可信可靠，病历齐全，为之后的研究提供有力支持。

1.2 检测方法

1.2.1 多重PCR检测流程

HPV检测采用多重PCR方法，在一个反应体系中同时进行多个靶标的扩增，通过精心设计的高危型、低危型HPV特异性引物，在样本处理、核酸提取、扩增引物加入及荧光定量检测等环节中，实现对不同亚型HPV的同步扩增与分型鉴定。该技术可一次性完成多种HPV亚型的联合检测，显著提升检测通量及效率。设备使用为全自动核酸提取仪与高通量实时PCR仪，扩增引物为HPV高危型、低危型等相关序列，确保检测结果准确可靠。

1.2.2 样本采集与阳性判定

标本收集使用宫颈液基细胞采集器以及标准化的咽拭子或者痰液的采集动作，保持核酸完整度高，阳性判断以设定Ct值标准进行判定，小于该值为阳性，大于该值为阴性，可以同时发现单个或者多重病原体感染情况，提高检测敏感性和精确度[1]。

1.3 统计学分析

所有数据用SPSS 26.0软件进行统计学处理。定量指标以均值±标准差表示，两组间比较采用t检验；定性指标以百分比的形式来比较其发生频率是否具有统计学意义采用的是卡方检验的方法，检验水准设置为P＜0.05时，则认为有统计学差异。本研究可以为TCT联合HPV检测应用于临床筛查中提供参考依据。

2 结果

2.1 宫颈液基与HPV结果

在548例宫颈标本中，TCT检查阳性者共312人占总人数的56.9%，其中ASC-US及以上病变128例占23.4%。在520份宫颈标本内，HPV多重PCR检测呈阳性119份（22.9%），高危型HPV占了15.8%，低危型占了7.1%，多型感染检出率为6.2%，比单型检测来说，在多型感染检出上有更显著的优势（6.2% VS 2.3%，p＜0.05）。TCT与HPV联合检测的阳性符合率显著高于单项检测，两种方法联合应用可提高宫颈病变的检出效能。综上所述，TCT联合HPV检测应用于宫颈癌筛查有着更好的检出率，特别是对多型感染及高级别病变的检出率有特别高的优势（表1）。

表1 多重PCR与传统方法及HPV检测结果比较

3 讨论

TCT联合HPV检测应用于宫颈癌筛查具有突出的优点。一方面，TCT可观察细胞形态学改变，HPV检测可明确病毒感染状态，两者联合应用可相互补充，提高筛查的敏感性和特异性，减少漏诊和误诊。另一方面，多重PCR技术应用于HPV分型检测时能够提供较高的灵敏度和特异性，在病毒载量较低的情况下也能进行准确发现，能够做到早期发现、早期治疗的目的。而且多重PCR的方法对HPV多型感染的检出率也远远超过了单型检测方法，减少了由于漏检或者错检带来的风险，使整体的检测结果更为可靠[3]。

与传统的单一TCT筛查或单独HPV检测比较起来，联合检测明显地规避了各自不足之处。单一TCT检查受制片质量、判读主观性等因素制约，存在一定的假阴性和假阳性；单型PCR只可以对某一种HPV亚型进行检测，不能准确判断混合感染情况[3]。

在临床上，TCT联合HPV检测的结果可以为宫颈病变的早期干预提供有效的参考，让医师能够根据检验结果制定针对性的随访或治疗方案，避免过度诊疗或延误病情，在宫颈癌防治工作中具有重要意义[4]。但是，现阶段多重PCR在临床上的应用存在着价格昂贵，实验仪器昂贵且复杂，需要专门人员操作等问题。将来应该从完善试剂数量化，整合实验系统，加强自动化水平等方面入手以提升多重PCR检测灵敏度和准确度的同时，使更多的基层医疗卫生机构也能使用上这项技术。

4 结论

在临床上，TCT联合HPV检测的结果能够为宫颈病变的早期干预提供精准、有效的参考依据，使临床医师可根据细胞学异常类型及HPV感染亚型进行风险分层，进而制定个体化的随访或治疗方案，在保障患者安全的前提下，有效避免过度诊疗或延误病情，对提升宫颈癌防治工作的整体质量具有重要临床意义[4]。然而，现阶段多重PCR技术在临床应用中仍面临价格较为昂贵、检测仪器成本高且操作流程复杂、需要经过专门培训的技术人员操作等现实问题，在一定程度上限制了其在基层医疗机构的推广普及。未来应从优化试剂配比、实现检测体系标准化、整合一体化实验平台、提升自动化与智能化水平等方面入手，在不断提高多重PCR检测灵敏度与准确度的同时，逐步降低检测成本，简化操作流程，使该项技术能够更广泛地应用于基层医疗卫生机构，惠及更多筛查人群。

参考文献：

[1]刘倩文,张世豪,周刘勇,等.宫颈液基细胞学与DNA倍体和HPV分型联合检测对提高宫颈癌筛查检出效能的影响[J].医药论坛杂志,2022,43(21):39-42.

[2]石龙姣,孙玉宁.HPV检测、液基细胞学检测及DNA倍体分析在宫颈癌筛查中的应用[J].实用妇科内分泌电子杂志,2023,10(11):100-102.

[3]赵芳,马德勇,王婷婷,等.宫颈液基细胞学p16及其联合高危HPV检测在宫颈癌和癌前病变筛查中的诊断价值[J].疑难病杂志,2023,22(04):390-394+401.

[4]徐建勤,袁军,周炜根.薄层液基细胞学检测联合人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA检测在宫颈上皮内瘤样病变和宫颈浸润癌筛查中的应用价值[J].中国妇幼保健,2024,39(14):2603-2606.