不同抗凝剂对血常规检测中血小板计数的影响及临床选择建议

【摘要】目的：探讨乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）、枸橼酸钠（SC）和肝素锂（LH）三种常用抗凝剂对血常规检测中血小板（PLT）计数结果的影响，为临床精准检测和合理选择抗凝剂提供依据。方法：选取2023年1月至6月我院收治的120例患者作为研究对象，每例患者同时采集3管静脉血，分别采用EDTA-K₂、SC和LH抗凝。使用全自动血液分析仪检测PLT计数。比较三种抗凝剂组间PLT计数的差异，分析不同临床诊断患者中的差异显著性，并观察血小板假性减少症（PTCP）的发生率。结果：三种抗凝剂检测的PLT计数差异具有统计学意义（ P<0.05），EDTA-K₂组PLT计数显著高于SC组和LH组（P<0.05），SC组结果最低；共检出12例（10.00%）EDTA依赖性PTCP；在不同疾病亚组（如肿瘤、肾病）中，三种抗凝剂的差异趋势一致，但程度不同。结论：抗凝剂的种类显著影响PLT计数结果，其中EDTA-K₂可能导致PTCP，而枸橼酸钠抗凝血的结果通常最低。临床实验室应认识到这种差异，对疑似PTCP或临界值样本，建议采用枸橼酸钠抗凝血进行复检或手工法复核，以确保结果的准确性。

【关键词】不同抗凝剂；血常规检测；血小板计数

血常规检测是临床最基础、最重要的检验项目之一，其中血小板（PLT）计数对于评估止凝血功能、诊断血液系统疾病、监测化疗后骨髓抑制状态等具有至关重要的价值[1]。结果的准确性直接影响到患者的诊断与治疗决策。目前，国际血液学标准化委员会推荐乙二胺四乙酸盐（EDTA-K2）作为血常规检测的首选抗凝剂，因其对细胞形态影响最小且抗凝效果稳定[2]。然而，在临床实践中，部分患者采用EDTA-K₂抗凝时会出现血小板假性减少症，这是由于EDTA诱导血小板发生聚集，导致仪器计数结果显著偏低所致[4]。此外，枸橼酸钠和肝素锂等抗凝剂也在特定场景下使用。不同抗凝剂通过不同的机制影响血液状态，可能导致PLT计数存在差异。本研究旨在通过对比EDTA-K₂、枸橼酸钠和肝素锂三种抗凝剂对同一患者PLT计数的影响，分析其差异性和相关性，并为不同临床情境下的抗凝剂选择提供科学建议，以期减少误诊误治。

1资料与方法

1.1 研究对象

选取2023年1月至2023年6月在我院进行血常规检测的住院患者120例作为研究对象。其中男性68例，女性52例，年龄18-85岁，平均年龄（52.4±15.7）岁。疾病分布：肿瘤性疾病35例，肾脏疾病28例，心血管疾病22例，感染性疾病20例，其他疾病15例。纳入标准：①年龄≥18岁；②临床病情稳定，需进行血常规检查；③知情同意并自愿参与本研究。排除标准：①存在严重凝血功能障碍者；②采血困难者；③24小时内输注过血小板或全血者。

1.2 干预方法

采用标准静脉采血法，由经验丰富的护士统一操作。使用同一厂家的真空采血管，每例患者依次采集3管血液，抗凝剂分别为：①EDTA-K₂管（紫色头盖，2.0 mL）；②3.2%枸橼酸钠管（蓝色头盖，2.7 mL，血液与抗凝剂比例为9:1，实际采血1.8mL）；③肝素锂管（绿色头盖，2.0 mL）。采血顺序严格按照说明书进行，以避免采血顺序带来的误差。采血后立即轻柔颠倒混匀5-8次。

1.3 检测方法

所有样本在采集后2小时内于Sysmex XN-1000全自动血液分析仪上完成检测。仪器每日进行质控，且在检测前均已校准，保证运行状态良好。每个样本检测两次取平均值。对于PLT计数结果异常（如过低、出现报警信息）的样本，立即制作血涂片，进行瑞氏染色后显微镜下观察血小板形态及有无聚集。

1.4 统计学方法

计量资料以均数±标准差（x̄±s）表示。三种抗凝剂组间的PLT计数比较采用单因素重复测量方差分析，若差异有统计学意义，进一步采用LSD-t法进行两两比较。不同疾病亚组间的比较采用多因素方差分析。计数资料以率（%）表示，采用χ²检验。以P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1 三种抗凝剂PLT计数结果的总体比较

120例样本经三种抗凝剂抗凝后检测，PLT计数结果总体比较差异具有统计学意义（P<0.05）。EDTA-K₂组PLT计数最高，肝素锂组次之，枸橼酸钠组最低。两两比较显示，任意两组之间的差异均具有统计学意义（P<0.05）。具体数据见表1。

表1 三种抗凝剂PLT计数结果的比较 (,x̄±s)

*注：a表示与EDTA-K₂组比较P<0.05；b表示与SC组比较P<0.05；c表示与LH组比较P<0.05。

2.2 不同临床诊断患者中三种抗凝剂的PLT计数比较

为进一步探讨抗凝剂在不同患者群体中的影响，本研究按主要疾病分类进行了亚组分析。多因素方差分析显示，在不同疾病类型中，三种抗凝剂对PLT计数的影响趋势与总体一致（均为EDTA-K2> LH > SC），但其差异程度（即效应大小）有所不同。特别是在肿瘤组和肾病组中，SC组与EDTA-K₂组的差值更大。详见表2。

表2 不同疾病患者三种抗凝剂PLT计数结果比较 (×10⁹/L, x̄±s)

注：组内比较（同一行）：a、b、c含义同表1；组间比较（同一列）：不同疾病组间PLT计数存在差异。

2.3 EDTA依赖性假性血小板减少症（PTCP）的发生情况

经血涂片镜检确认，120例样本中，在EDTA-K₂抗凝剂下共发现12例样本存在血小板聚集现象，PTCP发生率为10.00%（12/120）。这12例样本在LH抗凝管中有3例仍出现轻微聚集，在SC抗凝管中均未发现聚集。SC抗凝剂纠正了所有PTCP，其PLT计数结果显著高于EDTA-K₂管（P<0.001）。见表3。

表3  12例PTCP患者在不同抗凝剂下的PLT计数结果 (×10⁹/L, x̄±s)

*注：a表示与SC组比较P<0.05。

3讨论

本研究系统地比较了EDTA-K₂、枸橼酸钠和肝素锂三种抗凝剂对血常规PLT计数的影响。结果表明，抗凝剂的选择确实会导致检测结果的系统性偏差，这与国内外多项研究结论一致[5]。

本研究结果显示，EDTA-K₂抗凝管的PLT计数平均值最高，但其较高的标准差和10.00%的PTCP发生率提示其结果的离散程度和风险也最大。PTCP的发生机制主要是EDTA盐诱导血小板活化，激活GPⅡb/Ⅲa受体，介导了纤维蛋白原依赖性的血小板聚集[6]。本研究发现的10%发生率处于文献报道的0.1%-2%范围的上限[7]，这可能与本研究对象为特定疾病住院患者群体有关，肿瘤、肾病患者更易发生PTCP。枸橼酸钠抗凝管的PLT计数结果在三组中最低，平均约为EDTA-K₂组的92.2%。这一现象主要源于两个因素： firstly，枸橼酸钠抗凝管中血液与抗凝剂的稀释比例是9:1，理论上PLT计数应乘以1.11（即10/9）进行校正后才能与EDTA-K₂管结果相比较[8]。其次，即便经过数学校正，枸橼酸钠抗凝血的血小板计数仍可能略低，可能与抗凝剂本身的轻微细胞收缩效应有关。但关键在于，本研究中枸橼酸钠成功纠正了所有EDTA引起的PTCP，使其成为识别和验证PTCP的首选方法。肝素锂的抗凝机制是通过增强抗凝血酶Ⅲ的活性来抑制凝血过程。本研究显示其PLT计数结果介于EDTA-K₂和枸橼酸钠之间。但需要注意的是，肝素可能引起白细胞和血小板的聚集[9]，本研究中12例PTCP患者中有3例在肝素锂管中仍出现聚集也证实了这一点，因此肝素锂不推荐用于常规血细胞计数检查。

从临床选择建议的角度，本研究提出以下观点：① EDTA-K₂ 仍是绝大多数情况下的首选抗凝剂，其标准化和稳定性最佳。② 当血液分析仪出现PLT计数低位报警、直方图异常（如尾部抬高、左侧偏移）或结果与临床情况严重不符时，应高度怀疑PTCP。③ 枸橼酸钠抗凝管是复核疑似PTCP样本的“金标准”。实验室应建立用枸橼酸钠抗凝血进行复查的标准操作程序（SOP），并明确是否需要乘以校正系数（对于PLT计数，许多实验室和学者认为直接报告未校正结果更具临床相关性，以避免过度校正）[10]。④ 肝素锂因其可能导致细胞聚集，应避免用于PLT计数，但其适用于血气分析、电解质等血浆生化检测。本研究的局限性在于样本量相对有限，且来自单一中心。未来可扩大样本量，并进一步探讨不同抗凝剂对血小板其他参数（如MPV、PCT）的影响。

4、结论

综上所述，临床医师和检验工作者必须认识到不同抗凝剂对PLT计数存在的显著影响。建立规范的复检流程，对异常结果及时采用枸橼酸钠抗凝血或手工法进行复核，是确保血小板计数准确、避免临床误诊的关键措施。

参考文献

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