细菌培养和涂片镜检应用于微生物检验中的准确性比照观察

摘要：目的 在微生物检验当中，对比观察两种不同检验方法（其一：细菌培养，其二：涂片镜检）的准确性。方法 统共收集100份标本（29份痰液标本，25份尿液标本，22份脓液标本，24份胸腹水标本；对应100例患者，男52例，女48例，年龄46.34±10.15岁），实施涂片镜检、细菌培养+涂片镜检，再经由精密度验证法作为金标准，分析微生物检验结果，对比不同检验方法在不同标本当中的诊断符合率，以及在不同微生物类型中的检出符合率。结果 100份标本当中，全部有微生物存在，革兰阳性菌、阴性菌及真菌分别对应27份、48份、25份。涂片镜检、细菌培养+涂片镜检两种检验方法在不同标本中诊断符合率相当（P＞0.05），在不同微生物中检出符合率相当（P＞0.05）。结论 微生物检验当中，不论是涂片镜检，还是细菌培养，检验结果的准确性都比较高，都可以可靠鉴别微生物类型，但是如果在细菌培养后再实施涂片镜检，不免操作时间过长，故可以先直接用原始标本做涂片镜检，不仅准确性高，而且效率也高。

关键词：微生物检验；涂片镜检；细菌检验

中图分类号：R-1

近些年，社会整体环境发生了很大的变化，使得感染类疾病的发病率有所上升，鉴于感染疾病有许多种类型，而且不同类型的治疗方案有较大差异性，因此要在治疗前确定具体感染类型，才能取得更好的治疗结局，如果在没有确定病原菌类型的情况下就做抗感染治疗，不但疗效低，还可能导致病情恶化，甚至造成生命风险[1]。现阶段，抗生素是治疗感染疾病的主要药物类型，抗生素滥用情况有所加剧，感染疾病发生风险也随之增加。通过以上的分析可以总结出，为了让细菌对抗生素的敏感性增加，提高感染性疾病治疗有效率，应该于治疗之前实施微生物检验，确定病原菌具体的类型，再针对性用药[2]。微生物检验目前比较常用的方法是涂片镜检，一般是在细菌培养标本之后，再做涂片镜检，但是，细菌培养耗时长，导致整体检验需要花费较长的时间，如此很容易耽误患者病情，为了探讨是否能直接使用原始标本做涂片镜检，此次研究对比了细菌培养和涂片镜检在微生物检验当中的准确性，以下是详细内容。

1资料与方法

1.1资料

总共收集了100份标本作为此次研究对象，其中有29份是痰液标本，25份为尿液标本，22份是脓液标本，剩下的24份是胸腹水标本。这100份标本来源于100例患者，包括了52例男性和48例女性，年龄最大的是80岁，最小的是12岁，平均是46.34±10.15岁。

1.2纳入标准和排除标准

纳入标准：（1）有效标本；（2）检验结果数据有效。

排除标准：（1）运输或检验过程中不慎导致标本污染；（2）检验结果数据不明。

1.3方法

100份标本全部做涂片镜检，以及实施细菌培养+涂片镜检法，以精密度验证法作为金标准，以上各种检验方法的操作过程如下：

（1）涂片镜检。采用压片法来制作标本，进行常规性的涂片处理，原始标本使用无菌消毒棉签置入到生理盐水当中，将两者充分性的混合，之后，用酒精灯加热，随后，自然风干涂片，实施革兰染色后做镜检，一个涂片的观察视野是10个，将观察结果予以记录。

（2）细菌培养+涂片镜检。在血平板和沙氏平板上，做画线接种操作，设定温度为35℃，以5%至10%二氧化碳培养18小时至72小时，培养环境温度设置为37℃，培养时间控制在24小时到120小时之间，标本当中的微生物、致病菌以及优势菌落，使用山东鑫科XK细菌鉴定/药敏分析仪系统进行鉴定，在鉴定时，可以对涂片镜检当中的病原菌做重点性的筛选。

（3）精密度验证法。将致病菌的菌悬液予以制作，可做标准度数的最高值设为菌悬液浓度，系列稀释＜10cfu/min，一个致病菌所用的菌悬液需要达到五种浓度及以上，并且同时一个浓度需要检验十次及以上。

1.4分析指标

将精密度验证法结果作为金标准，分析微生物检验结果，比较涂片镜检、细菌培养+涂片镜检两种检验方法在不同标本当中的诊断符合率，以及在不同微生物类型中的检出符合率。

1.5统计学方法

研究活动当中所有涉及到数据类型，全部经由SPSS27.0版本统计学软件处理，计数资料→[n（%）]→χ²检验，计量资料→（`c±S）→t检验，P＜0.05→数据存在统计学意义，反之，则无统计学意义。 

2结果

2.1检验结果分析

表1示，100份标本经精密度验证法发现全部有微生物存在，其中革兰阳性菌有27份，革兰阴性菌有48份，真菌有25份。

表1检验结果分析（份）

2.2不同标本当中的诊断符合率对比

表2示，两种检验方法在不同标本中，诊断符合率无明显差异，统计值P＞0.05。

表2不同标本当中的诊断符合率对比[n（%）]

2.3不同微生物类型中的检出符合率对比

表3示，不同检验方法于不同微生物类型中，检出符合率差异较小，统计值P＞0.05。

表3不同微生物类型中的检出符合率对比[n（%）]

表3续表[n（%）]

3讨论

感染性疾病种类在不断增加，主要和病原体复杂度增加有关，抗菌药物滥用将会增强病原微生物耐药性，使得疾病整体治疗难度升高。感染后要及时鉴别出微生物具体的类型，对病情做综合性评估，再制定针对性的治疗方案。当前微生物检验的方法有很多，比较新颖的比如分子生物学检验法、免疫学法等等，但是实际应用比较多的仍然是为传统微生物检验法，比如染色法、培养法、生物鉴定法等[3]。

涂片镜检法在微生物检验当中应用率很高，操作方法分为两种，第一种是在细菌培养后进行涂片镜检，另一种是直接用原始标本做涂片镜检，分析这两种方法的具体情况是，细菌培养耗时长，会耽误患者治疗，从该角度考虑，用原始标本做涂片镜检更早检测出致病菌，深入分析此方法有多个优势，首先第一个，能够可靠鉴别致病菌的类型，再来判断疾病类型，比如如果在痰液标本中发现了葡萄球菌，基本可以断定对应患者患的是肺炎，如果检出的是结核分枝杆菌，一般就是肺结核，如果发现的是特殊形态的致病菌，可以考虑脓肿或者是胸膜炎，所以涂片镜检在疾病类型判断中帮助较大[4-6]；其次第二个优势是，能够判断标本的质量水平，如果检验的标本质量不达标，不免会发生检验误差，随之可能导致治疗不当，让疾病愈演愈烈[7]，但是如果使用原始标本做涂片镜检，操作时需要做革兰染色，此时可以分成三级，低倍数显微镜视野当中，白细胞数目≥25个，鳞状上皮细胞数目≤10个，为A级，白细胞数目≥25个，鳞状上皮细胞数目介于10个到25个之间，细菌种类≥3种，为B级，但如果鳞状上皮细胞数目≥25个，则为C级，即标本不合格[8-9]，无法用于检验，需重新取材，否则检验结果将有误差；最后第三个优势，能够鉴定致病菌类型，在检验时部分微生物存在典型形态[10-11]，因此鉴别的结果比较可靠。

分析本次的研究结果发现，涂片镜检、细菌培养+涂片镜检两种检验方法在不同标本中诊断符合率、不同微生物中检出符合率都相当，由此可以说明，将原始标本用作涂片镜检，也能较准确判断感染情况，如果先做细菌培养，再做涂片镜检需要花费大概两到三天的时间，容易耽误病情，致病菌还可能改变，从整体而言，先直接涂片镜检耗时短，准确性也较高，可以满足临床急重患者需求[12-14]。

总而言之，细菌培养与涂片镜检在微生物检验当中准确性都比较高，相对而言，直接使用原始标本做涂片镜检的能较早的确定致病菌，对临床帮助较大。

参考文献：

[1] 王甲银.细菌培养和涂片镜检在微生物检验中的临床应用价值[J].实用检验医师杂志,2023,15(3):250-253.

[2] 江正潮.细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的作用及阳性率分析[J].中国医疗器械信息,2023,29(21):80-82.

[3] 信统艳.探讨微生物检验中细菌培养、涂片镜检的诊断价值[J].系统医学,2023,8(13):47-49,53.

[4] 程庆妮,刘娜.涂片镜检与细菌培养检查在微生物检验中的应用效果[J].临床医学研究与实践,2023,8(32):97-100.

[5] 何敏霞,宛传丹,戈惠丽,等.临床呼吸道感染细菌培养检验中涂片镜检技术的病原学诊断价值研究[J].医学检验与临床,2022,33(1):39-42.

[6] 刘慧英.不同微生物检验方法对妇科念珠菌阴道炎患者阴道分泌物检验的效果[J].实用妇科内分泌电子杂志,2022,9(2):83-85.

[7] 周慧,张骅阳.血涂片镜检法评估血小板聚集程度对血小板计数的影响[J].国际检验医学杂志,2024,45(23):2834-2837,2843.

[8] 孙丽丽.细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的临床意义研究[J].医学信息,2022,35(z2):120-122.

[9] 洪清菲.血涂片显微镜检查在血常规检验中的必要性研究[J].中国现代药物应用,2022,16(19):80-82.

[10] 刘小宁.全自动血细胞分析仪联合血涂片在血常规检验中的应用[J].中国医疗器械信息,2022,28(10):87-89.

[11] 宋春雁.痰真菌培养及涂片镜检在下呼吸道感染中的诊断价值分析[J].中国现代药物应用,2022,16(6):64-66.

[12] 余梅香,杨爱红,彭林英.血涂片细胞形态学检测联合全自动血液细胞分析仪在血常规检验中的应用价值[J].医学信息,2022,35(24):157-159.

[13] 王丹.血常规检验中全自动血细胞分析仪与血涂片细胞形态学的联合应用价值探讨[J].中国医疗器械信息,2022,28(8):55-57.

[14]FRANCOIS,GOEHRINGER, BENOIT,LALLOUÉ, CHRISTINE,SELTON-SUTY, et al. Compared Performance of the 2023 Duke–International Society for Cardiovascular Infectious Diseases, 2000 Modified Duke, and 2015 European Society of Cardiology Criteria for the Diagnosis of Infective Endocarditis in a French Multicenter Prospective Cohort[J]. Clinical infectious diseases,2024,78(4):937-948.

作者简介：齐亚南，（1983年-）女，汉，北京人，科室： 检验科 研究方向：微生物 学位： 无 专业： 医学检验 职称： 副主任技师