卡式微柱凝胶技术在ABO和RhD血型鉴定中的应用效果评价

【摘要】目的：分析卡式微柱凝胶技术在ABO和RhD血型鉴定中的应用效果。方法： 本次研究共纳入200例2023年1月-2023年12月我院患者为研究对象，以每组100例对患者进行分组，参照组采用血型鉴定经典方法--试管法、研究组采用卡式微柱凝胶技术，对比两组血型鉴定情况。结果： 一次血型鉴定准确率，ABO血型：研究组99（99.00%）、参照组100（100.00%）,两组数据对比差异性不明显（P＞0.05）；RhD血型：研究组100（100.00%）、参照组100（100.00%）,两组数据对比无差异（P＞0.05）。结论： 卡式微柱凝胶技术在ABO和RhD血型鉴定试验中的应用效果理想，值得广泛应用。

【关键词】卡式微柱凝胶技术；ABO血型鉴定；RhD血型鉴定；应用效果

血型鉴定在临床工作中具有重要意义：（1）临床输血前需要做血型鉴定， 可避免非同型输注引起的溶血反应；（2）器官移植时选择血型相符合的供体，减少出现排异的情况；（3）可以帮助查看不孕症或新生儿溶血症的原因；（4）亲子鉴定等。准确的血型报告在临床工作中至关重要。

ABO血型是根据红细胞表面有无特异性抗原A或（和）B 来划分的，同时血清中含有针对自身红细胞所缺的A或B抗原产生的同种凝集素（抗A、抗B）。人类红细胞上A和B抗原的有或无与血浆中抗A和抗B抗体的产生存在着相反的互补关系。利用红细胞凝集试验，通过正反定型可准确鉴定ABO血型 [1]。Rh血型系统是输血医学中仅次于ABO系统的第二大血型系统。D抗原是Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只作D抗原鉴定，凡带有D抗原者称为Rh阳性，不带D抗原者称为 Rh阴性[1]。

试管法是血型鉴定的经典方法，一直被人们俗称为“金标准”。因此将微柱凝胶法与试管法对比，分析其在ABO和RhD血型鉴定试验中的应用效果，具体如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究共纳入200例2023年1月-2023年12月我院患者为研究对象，以每组100例对患者进行分组，研究组：年龄18-60岁，均数（39.25±2.37）岁，45例男性55例女性；参照组：年龄20-60岁，均数（40.19±2.25）岁，52例男性、48例女性；统计学对所有研究资料中数据分析后显示P＞0.05，故具备分组条件。

1.2方法

1.2.1试管法

[样本]

采EDTA抗凝血2ml，离心分离红细胞与血浆。将待检红细胞用生理盐水洗涤3次，然后配置成3%~5%红细胞悬液。   

[试剂]

(1) 抗A、抗B、RhD血型定型试剂。

(2) 反定型试剂：A1型，B型红细胞悬液（浓度3%~5%）。

 [操作]

(1)正定型:

取两个试管分别标记抗A、抗B 。分别滴加1滴抗A、抗B到对应试管中，再向每一试管滴加1滴3%~5%的待检红细胞悬液。混匀后，1000xg离心10秒，取出轻轻摇动试管重悬细胞扣，再振摇试管观察凝集情况。手工记录试验结果，并与血浆试验结果对照。

(2)反定型:

取3个试管，分别标记Ac、Bc和Oc。分别向其中滴加2 滴血浆，取A1型试剂红细胞1滴加入Ac管，B型试剂红细胞1滴加入Bc管，3%~5%的待检红细胞悬液1滴加入Oc管。轻轻混合试管内容物，1000xg离心10秒。取出检查是否有溶血现象，然后轻摇重悬细胞扣，再振摇试管观察凝集情况。手工记录试验结果，并与红细胞试验结果对照。

（3）RhD鉴定 

取1个试管，标记-D。滴加1滴RhD血型定型试剂到试管中，再向其中滴加1滴3%~5%的待检红细胞悬液。混合试管内容物，然后1000xg离心10秒。取出轻轻摇动试管重悬细胞扣，再振摇试管观察凝集情况。手工记录试验结果。

2.2.2卡式微柱凝胶

[样本]

采EDTA抗凝血2ml，离心分离红细胞与血浆。将待检红细胞配置成0.8%红细胞悬液。   

[试剂]

(1)ABO反定型试剂红细胞（浓度0.8%）。

(2)微柱凝胶血型卡。

[操作]

试验采用6孔微柱凝胶卡。将微柱凝胶血型卡做好标记。在凝胶检测孔-A、-B、-D、对照4孔中分别加入0.8%待检红细胞悬液各50μL。在凝胶检测孔Ac、Bc中先加入血浆各50μL，再将A1型红细胞悬液1滴加入Ac管，B型红细胞悬液1滴加入Bc管，每管50μL。使用专用离心机离心5分钟，取出判读结果。（可全自动血型仪自动化操作）

2.3 判定标准

对比两组ABO和RhD血型鉴定情况 

2.4 统计学方法

计数(n%)代表率，检验用χ2；计量用（`x±s），检验用t。文中所体现的数据均借用SPSS21.0数据包深入处理，若显示P＜0.05， 说明了有意义。

3 结 果

表1对比两组被检测者一次血型鉴定准确率[（n）%]

4 讨论

卡式微柱凝胶技术是一种基于凝胶免疫学的血型鉴定方法。其基本原理是利用微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗体与红细胞上的血型抗原发生特异性结合，从而形成凝集的红细胞[2]。这些凝集的红细胞会被留在微柱的上面，形成带状或凝集颗粒散布在凝胶表层或中间。而未凝集的红细胞，即未与抗体结合的红细胞，则会通过离心后沉入微柱的底部。通过观察微柱凝胶中红细胞的分布情况，可以准确鉴定出红细胞的血型。卡式微柱凝胶技术是较新的血型血清学检测技术。研究中，其一次血型鉴定准确率与经典试管法相比毫不逊色，基本无差异（P＞0.05），且操作简便易于标准化、自动化，判读客观可靠、结果重现性好亦可长期保存，有利于大量样本的检测。相比传统检验方法，其鉴定血型的敏感性和稳定性都更高[3]。

综上所述，卡式微柱凝胶技术在ABO和 RhD血型鉴定检验中的应用效果理想，值得广泛应用。 

【参考文献】

[1] 尚红，王毓三，申子瑜. 全国临床检验操作规程. 第4版. 人民卫生出版社,  2019

[2] 黄婉怡. 微柱凝胶免疫检测技术在临床血型鉴定与输血中的应用价值[J]. 中国医药科学,2019,9(3):85-87,95.

[3] 赵自勇,孙振威,薛成军,等. 微柱凝胶技术对临床输血安全的影响[J]. 黑龙江医学,2021,45(7):758-759.