民族药云南鼠尾草紫丹参的引种及质量评价研究

摘要：目的 对野生云南鼠尾草紫丹参进行种植选址分析并引种试种，经质量检测确保试种样品质量，解决院内制剂因紫丹参野生资源短缺导致的原料供应不稳定问题。方法 分析紫丹参生长环境、生活习性，以及种植试验区格当村的地理条件，选取种植适宜地建立种植试验区，通过显微鉴定、薄层色谱鉴别（TLC）及高效液相色谱（HPLC）含量测定，对栽培品紫丹参进行评价质量。结果 选取了云南省富宁县格当村新寨、龙哩、兵州三个村小组建立种植试验区进行引种驯化，引种栽培得到的紫丹参可观察到显微特征石细胞、韧皮细胞、纤维管胞；薄层鉴别可检出丹参酮IIA、丹酚酸B；含量测定中，新寨产紫丹参含丹参酮类0.08%、丹酚酸B 1.2%，龙哩产紫丹参含丹参酮类0.30%、丹酚酸B 5.6%，兵州产紫丹参含丹参酮类0.10%、丹酚酸B 2.4%。结论 种植得到的紫丹参可检出紫丹参显微特征及活性成分，其中龙哩试验区紫丹参中丹参酮类及丹酚酸B含量较高，可优先选择该区进行紫丹参标准化种植，为院内制剂提供稳定优质原料，展现其资源保障价值。

关键词：云南鼠尾草；紫丹参；种植选址；质量评价

Introduction and Quality Evaluation of Salvia yunnanensis C.H.Wright

Liu Huanhuan, Wu Shengyou, Wang Piao, Qin Jingli, Yan Yongming△

(Wenshan Hospital of Traditional Chinese Medicine, Wenshan, Yunnan 663099)

[Abstract] Objective: To identify optimal cultivation sites for wild Salvia yunnanensis C. H. Wright, and verify the quality of the cultivated material, thereby ensuring a stable supply of raw material for hospital preparations threatened by the depletion of wild resources.Methods: The growth environment, ecological habits, and geographical conditions of the planting trial area in Gedang Village were analyzed. Suitable sites were selected to establish the planting trial area. The quality of S. yunnanensis was evaluated through microscopic identification, thin-layer chromatography (TLC) identification, and high-performance liquid chromatography (HPLC) content determination. Results: Three sub-sites (Xinzhai, Longli, and Bingzhou) were selected for the establishment of experimental plots.Microscopic examination revealed characteristic stone cells, phloem cells, and fibre tracheids consistent with the botanical identity of S. yunnanensis. TLC confirmed the presence of tanshinone IIA and salvianolic acid B. HPLC analysis showed the following contents:Xinzhai: total tanshinones 0.08 %, salvianolic acid B 1.2 %. Longli: total tanshinones 0.30 %, salvianolic acid B 5.6 %. Bingzhou: total tanshinones 0.10 %, salvianolic acid B 2.4 %. Conclusion: Cultivated S. yunnanensis retained both diagnostic microscopic features and key bioactive constituents. Material from the Longli plot exhibited the highest levels of tanshinones and salvianolic acid B, and is therefore recommended as the primary site for standardised cultivation. This approach secures a sustainable and high-quality source of S. yunnanensis for hospital formulations and mitigates dependence on wild populations.

[Key words] Salvia yunnanensis C.H.Wright; purple Danshen ; site selection for cultivation; quality evaluation

云南鼠尾草紫丹参，又名滇丹参，为唇形科鼠尾草属云南鼠尾草Salvia yunnanensis C.H.Wright的干燥根，作为云南习用的丹参应付药材，所含有效成分丹参酮II A和原儿茶醛的含量较高，是较为理想的丹参药用植物资源。其性微温，味苦，入心、肝经[1]，功似 “四物”，善活血凉血，养血益心，祛痰生新，安神定志。文山州中医医院结合三十多年的临床用药经验，将含有紫丹参的方剂转化为院内制剂，在治疗高血压、高脂血症、高尿酸等病症方面展现了较好临床疗效。该制应用广泛，需求量逐年攀升。然而，其生产长期依赖于野生紫丹参资源的供应。近年来，随着生态环境变化及市场过度采挖，野生紫丹参资源日益紧张，导致市场供应量萎缩，价格波动且持续走高。更为严峻的是，野生药材由于生长环境、采收年限、采收及加工方式的不可控，存在不同批次间的质量差异大的风险，直接威胁到成品制剂的质量均一性和临床用药安全。为了从根本上摆脱对野生资源的依赖，保障院内制剂的稳定生产和质量可控，拟通过人工种植方式建立专属性原料供应基地。

1紫丹参生长环境及生长习性

1.1地理分布

紫丹参产云南东部、中部至西部，四川西南部及贵州西部，垂直分布范围为海拔1800-2900 m[2]。主要分布于山坡草地、林边路旁或疏林干燥地上，常见生境为山地红壤土的松杉林下和次生草地灌丛。在群落组成方面，常与松科、杜鹃花科、壳斗科、桦木科、紫草科伞形科、菊科、毛莨科、禾本科等多种植物伴生[3]。

1.2土壤适应性

紫丹参为深根性植物，根系发达程度影响药材品质，以土层较深厚、不易积水的砂壤土种植为宜，经济林、用材林、幼林期等林地适宜间作紫丹参[4]。深厚、疏松的土层为丹参根系纵向延伸提供了充足空间，但土壤过于肥沃反致参根不壮实，产生主根纤细、木质化程度降低的问题。此外，质地黏重、通透性差的土壤会限制根系的扩展与呼吸。因此选择理化性状适宜、肥力适中的土壤基质，不仅能提高其产量，还利于后续采挖作业[5]。近年来，农业灌溉等人为活动显著加剧了土壤次生盐渍化进程，盐胁迫对种子萌发和幼苗生长表现出显著的抑制效应，因此在种植布局时宜优先选择土壤盐分含量相对较低的区域[6]。

1.3气候适应性

紫丹参在气候适应性方面的文献报道较少，可参考同属植物丹参。丹参喜气候温和、阳光充足、空气湿润的环境。根系耐寒可越冬，茎叶不耐低温，冻害阈值均为-5℃，幼苗不耐高温，在苗期高温会导致幼苗停止生长甚至死亡，最佳生长温度18～25℃。光照需求方面，紫丹参种子萌发需光诱导，25℃发芽适温下，2~3天开始萌发，播种1周后出苗，生育期光照不足则生长迟缓[7]。丹参具有"耐旱忌涝"特性，适度干旱胁迫能显著增加丹参茎叶酚酸含量及抗氧化活性[8,9]。丹参忌涝，高温高湿易发叶斑病、根腐病两种病害[10]，大雨过后土壤通透性变差，容易出现烂根现象，因此雨季需注意田间排涝，防止田间积水，选择地势较高的地方种植，保障涝能排水，能大程度预防或减轻根腐病和叶斑病的发展[11]。

2种植试验区选址及其自然条件

为使院内制剂原药材紫丹参资源可持续利用，文山州中医医院刘欢欢主任作为全国中药特色传承人才，通过基地游学学习野生品种引种为家种的中药材种植方法，在文山州中医医院乡村振兴点格当村进行引种研究工作。格当村隶属云南省文山州富宁县新华镇，位于镇域西南部，距县城直线约15 km，全村国土面积18.54平方公里，辖街子保、老寨、龙哩、兵州等13个村小组，居住着汉族、苗族、彝族3种民族，有381户1692人。

格当村介于东经105°37′～105°45′、北纬23°35′～23°40′之间，地处滇东南喀斯特边缘—桂西丘陵过渡带，海拔在680～1 200 m之间，属于低山—丘陵地貌，地形条件复杂，坡地占比＞60%，坡度变化多样，利于排水。整体土层厚度30～80 cm，土壤多为石灰岩土，pH 6.5～7.8，局部缓坡地段有赤红壤pH 5.5～6.8，其含有的砂壤可增加土壤通透性。富宁县属南亚热带季风气候，年平均气温20.00℃，平均高温27℃，接近紫丹参生长温度上限但基本安全；低温16℃，高于紫丹参越冬临界温度，无冻害风险。年降水量1199.60毫米，全年日照时数1786.8小时，降水和光照充足，昼夜温差较大，有利于植物体内干物质和次生代谢产物的积累。

3引种紫丹参质量评价

3.1仪器与试药

3.1.1仪器

G-080S型超声波清洗机（深圳洁盟技术股份有限公司），BD-1薄层电动点样仪（武汉药科新技术开发有限公司），ZF-1S三用紫外分析仪（杭州齐威仪器有限公司），LC-2030 Plus高效液相色谱仪（岛津马来西亚工厂），CX33生物显微镜（奥林巴斯（中国）有限公司），FB224L分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司），LT502E电子天平（常熟市天量仪器有限责任公司）

3.1.2试剂与药品

甲醇、三氯甲烷、磷酸、石油醚（以上均购于成都市科隆化学品有限公司），乙酸乙酯（天津市恒兴化学试剂制造有限公司），丹参酮IIA（110766-202022，中国食品药品检定研究院），丹酚酸B（111562-201716，中国食品药品检定研究院），紫丹参药材来自富宁县新华镇格当村新寨、龙哩、兵州试验种植区。

3.2显微鉴别

本品粉末棕褐色。石细胞单个散在或几个相连，长梭形或类圆形、不规则形，纹孔稀疏。韧皮纤维长棒状，末端钝圆或平整，壁厚，胞腔小，成束或散在。纤维管胞众多，成束或散在，长棒状或长梭状。见图1。

3.3薄层鉴别

取紫丹参样品粉末1g，加入5mL乙醇，经15分钟超声处理后离心分离，取上清液作为供试品溶液。取同属植物丹参作为对照药材，同法制成对照药材溶液。另取丹参酮IIA对照品、丹酚酸B对照品，溶于乙醇配制成混合溶液，每1mL分别含丹参酮IIA 0.5mg和丹酚酸B 1.5mg，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，分别吸取上述三种溶液各5μL，条带状点样于同一硅胶G薄层板上，先以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（6：4：8：1：4）为展开剂进行展开，展至距原点约4cm，取出，晾干，再以石油醚（60~90℃）-乙酸乙酯（4:1）为展开剂进行二次展开，上行展开约8cm，取出，晾干。薄层板分别置日光及365nm紫外光灯下检视[1]。三个不同厂家薄层板点样结果显示，供试品色谱在与对照药材及对照品相应位置处，显相同颜色的斑点或荧光斑点。见图2。

3.4含量测定[14]

2025年3月将种植一年期的云南鼠尾草紫丹参药用部位根部，送至文山壮族苗族自治州检验检测认证院进行检测。

3.4.1丹参酮类含量测定

色谱条件 十八烷基键合硅胶（C18）填充柱；以乙腈为流动相A，以0. 02%磷酸溶液为流动相B，洗脱梯度程序参照表1执行；柱温20°C；检测波长270nm；以丹参酮II A峰计，理论塔板数≥60000。

表1 梯度洗脱比例

对照品溶液的制备 取丹参酮II A对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇溶解并定容，制备得到浓度为20mg/mL的溶液。

供试品溶液的制备 来自新寨（2025022001）、龙哩（2025022002）、兵州（2025022003）三地的紫丹参样本各3份，粉碎过三号筛，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密移取甲醇50mL至瓶中，密塞后称定重量，超声处理30分钟，取出冷却至室温，再称定重量，用甲醇补足失重，摇匀后过滤，取续滤液备用。

以丹参酮II A为参照峰，计算样品中隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A的含量。结果见表2。

3.4.2丹酚酸B 含量测定

色谱条件 十八烷基键合硅胶（C18）填充柱；以乙腈-0.1%磷酸溶液（22:78）为流动相；柱温20℃；流速1.2mL/min；检测波长286nm；以丹酚酸B峰计，理论板数≥6000。

　　对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇-水（8:2）混合溶液溶解，制备得到浓度为0.1mg/mL的溶液。

　　供试品溶液的制备 来自新寨（2025022001）、龙哩（2025022002）、兵州（2025022003）三地的紫丹参样本各3份，粉碎过三号筛，取约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密移取甲醇-水（8:2）混合溶液100mL，密塞后称定重量，超声处理30分钟，取出冷却至室温，再称定重量，用甲醇-水（8:2）混合溶液补足失重，摇匀后滤过，取续滤液，即得。

以丹酚酸B为对照，测定样品中丹酚酸B的含量。结果见表2。

表2 紫丹参中丹参酮类及丹酚酸B含量测定结果（n=3）

注：*紫丹参无国家标准，在《云南省中药材标准》中无含量测定项，因此参考《中国药典》中丹参的丹参酮类及丹酚酸B含量标准规定。

表2展示了不同产地紫丹参中丹参酮类和丹酚酸B的含量，其中龙哩产紫丹参样品在丹参酮类和丹酚酸B含量上均表现出较高的水平，表明其土壤和气候条件更适宜紫丹参活性成分的积累。因此，在未来的种植规划中，可优先考虑在龙哩地区进行紫丹参的规模化种植。

4讨论

鼠尾草属植物全世界约1000余种，生于温带或热带，我国有83种，25变种，9变型[17]，分布于全国各地，尤以西南为最多。该属有大量供药用的植物，大多以根入药。《中华本草》、《本草纲目》、《神农本草经》等药用古籍中共记载了药用鼠尾草属25 种（含变种），其中仅有《中国药典》所收录的丹参（S. militorrhiza Bunge）进行了大规模栽培，我国迄今尚无自主选育的鼠尾草品种或其他国产原种在多元化利用领域实现规模化推广[18]。我国南方各省各产区约有33种鼠尾草用作丹参代用品，主要用于治疗心血管系统疾病，最常见的混淆品种有山东的白花丹参（丹参的一种变型，S.miltiorrhiza var alba C.Y.Wu et H.W.Li)，甘肃、四川的紫丹参（甘西鼠尾草褐毛变种，S.przewalskii var mandarinorum (Diels) Stib），四川的土参（养麦地鼠尾草柔毛变型S.kiaometiensis L ev(var.pubescens Stib)，江西的南丹参（S.bowleyana Dunn）等[19,20]。为确保本院制剂产品原料药的来源统一性和质量一致性，所采用的野生云南鼠尾草紫丹参亟需实施标准化种植并经质量验证，从根本上保障制剂产品的品质和疗效。

近年来，格当村在最高人民检察院、文山州中医医院的定点帮扶下，通过“公司+支部+基地+村集体+农户”的模式，研究种植苦参230余亩、莪术10亩，使中药材产业在格当村有了一定的规模化、产业化发展。将紫丹参引入格当村进行规模化种植，是该地区产业发展的一个潜在方向。格当地处富宁县界线边域，辖区各村小组海拔不一，周边气候温差变化大。2023年10月经驻村工作人员走访调研，以及相关专家实地评估后，在新寨、龙哩、兵州三个村小组中选取一地进行示范种植，选取种植土地面积约1亩，以基源准确优良的云南鼠尾草紫丹参品种规范化种植。试种成功后，对试种样本进行显微鉴别、薄层色谱鉴别以及含量测定，以显微特征和有效成分为评价指标，确保生药的质量标准。通过比较有效成分含量的高低，优选出适宜的种植区域龙哩村小组。

在下一步扩大紫丹参的种植实践中，将结合龙哩地形的土壤和气候条件，制定更为科学的种植方案。通过优化种植密度、施肥量和灌溉方式等措施，进一步提高紫丹参的产量和品质。此外，将加强紫丹参病虫害的防控措施及杂草管理技术的优化，以确保紫丹参的最佳生长环境。在紫丹参原药材的品质评价方面，将深入研究紫丹参有效成分及其药理作用，填补紫丹参的药效研究空白，为紫丹参的深度开发与应用奠定更为坚实的科学基础。

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项目名称：2023年全国中药特色技术传承人才培训项目；国家中医药管理局，（国中医药人教函〔2023〕20号），

项目编号：T202348322005

项目：云南省高层次中医药人才培养项目（NO：云卫中医综合发〔2024〕1号））

项目:云南省科技厅科技计划项目

 编号:202403AC100019

课题名称:民族药云南鼠尾草紫丹参质量的初步研究

* 基金项目：全国中药特色技术传承人才培训项目（T202348322005）

第一作者介绍：刘欢欢（1984-），女，副主任药师，研究方向:中药学。

△通讯作者：颜永明