血管内皮生长因子在原发性肝癌中的诊断及预后影响研究

【摘要】目的：观察血管内皮生长因子用于原发性肝癌中的效果。方法：选取2022年7月至2023年7月间我院收治的50例原发性肝癌患者和肝脏良性疾病患者50例，通过免疫组织化学法检测肿瘤组织中VEGF表达水平，分析其与临床病理参数的相关性。采用Kaplan-Meier法评估VEGF表达与患者总生存期的关系，通过Cox比例风险模型进行多因素预后分析。结果：VEGF在PLC组织中的高表达率高于癌旁正常组织（P＜0.05）；肝癌组患者血清VEGF水平高于良性肝病组（P＜0.05）；VEGF表达水平与原发性肝癌的肿瘤大小、病理分级、门静脉癌栓、肿瘤包膜和临床分期等临床病理特征密切相关。结论：VEGF在PLC中高表达与肿瘤进展及不良预后密切相关，可能作为PLC早期诊断的潜在生物标志物及靶向治疗的新靶点。

【关键词】血管内皮生长因子；原发性肝癌；诊断及预后效果

原发性肝癌，尤其是肝细胞癌，是全球范围内导致癌症相关死亡的主要原因之一。其发病率与死亡率在全球范围内均居高不下，尤其在慢性乙型或丙型肝炎病毒感染、长期酗酒及非酒精性脂肪性肝病等高风险人群中更为显著。早期诊断和准确评估预后对于改善患者生存至关重要[1]。然而，由于症状不明显且缺乏特异性的生物标志物，许多患者在确诊时已处于晚期阶段，错过了最佳治疗时机。血管内皮生长因子作为一种关键的促血管生成因子，在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中扮演着重要角色。VEGF通过促进新生血管形成，为肿瘤提供必要的营养和氧气，从而支持肿瘤的发展[2]。近年来，大量研究表明，VEGF及其受体在多种恶性肿瘤中过度表达，并与肿瘤的进展、转移及不良预后密切相关。在原发性肝癌中，VEGF水平的升高不仅反映了肿瘤血管生成活跃的状态，也可能成为潜在的诊断标志物和治疗靶点[3]。本研究旨在探讨VEGF在原发性肝癌中的诊断价值及其对患者预后的影响，具体如下。

1资料和方法

1.1一般资料

选取2022年7月至2023年7月间我院收治的50例原发性肝癌患者，均经病理组织学或细胞学检查确诊，符合《原发性肝癌诊疗指南（2022年版）》中的诊断标准。男：女为24:26，年龄35-75岁，平均（56.5±8.5）岁。Child-Pugh肝功能分级：A级33例，B级17例。根据国际抗癌联盟（UICC）第八版肝癌TNM分期标准，Ⅰ期10例，Ⅱ期15例，Ⅲ期17例，Ⅳ期8例。并选取同期收治的肝脏良性疾病患者50例，男：女为25:25，年龄30-70岁，平均（52.0±7.0）岁；肝血管瘤20例、肝囊肿15例、肝局灶性结节性增生15例。组间一般资料比较，无显著性差异，P＞0.05。

1.2方法

清晨空腹状态，通过一次性真空采血管采集患者的外周静脉血5ml。其中3ml置于无抗凝剂的普通试管中，室温下静置30分钟，待血液自然凝固后，以3000转/分钟的速度离心15分钟，分离上层血清，分装至无菌EP管中，每管0.5ml，储存于-80℃冰箱待测。另外2ml血液注入含有乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀，用于后续的血常规及其他相关血液学指标检测。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清VEGF水平。

1.3观察指标

1.3.1VEGF表达水平相关指标

采用ELISA法测定血清VEGF含量（pg/ml），通过免疫组化法检测组织中VEGF表达，阳性产物定位于细胞核或细胞质，呈棕黄色。根据阳性细胞比例和染色强度半定量分析，计算VEGF阳性表达率。

1.3.2与原发性肝癌临床病理特征相关性指标

通过Pearson相关分析探讨VEGF表达与肝癌临床特征的关系，较大肿瘤、低分化、有门静脉癌栓及无包膜的肝癌患者血清VEGF含量和组织VEGF阳性率更高，表明VEGF水平与肿瘤大小、分化程度、侵袭性正相关。

1.3.3预后情况

根据无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）评估。

1.4统计学分析

数据以SPSS25.0软件处理，计量资料表达形式（x±s），t检验，计数资料表达形式（%），卡方检验，P＜0.05有统计学意义。

2结果

2.1血清VEGF水平

肝癌组患者血清VEGF水平高于良性肝病组（P＜0.05）。见表1。

表1  血清VEGF水平比较（ pg/ml，x ±s ）

2.2  组织中VEGF 阳性表达率

原发性肝癌组织中 VEGF 阳性表达率高于癌旁组织（P＜0.05）。见表 2。

表2  组织中VEGF阳性表达率比较（ % ）

2.3 VEGF与原发性肝癌临床病理特征相关性分析

VEGF 表达水平与原发性肝癌的肿瘤大小、病理分级、门静脉癌栓、肿瘤包膜和临床分期等临床病理特征密切相关。见表 3。

表3  VEGF与原发性肝癌临床病理特征相关性分析

2.4 VEGF对原发性肝癌患者预后影响分析结果

通过Kaplan-Meier法分析不同VEGF表达水平组原发性肝癌患者的无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）。根据血清VEGF水平（高于565.34pg/ml为高表达）和肿瘤组织VEGF阳性表达强度，将患者分为高、低表达组。结果显示，VEGF高表达组的中位PFS为8个月，显著短于低表达组的16个月；中位OS为12个月，也低于低表达组的24个月（P＜0.05）。Cox比例风险回归模型多因素分析表明，VEGF表达水平（HR=2.45，95%CI：1.43-4.17）、肿瘤分期（HR=1.96，95%CI：1.12-2.68）、病理分化程度（HR=1.57，95%CI：1.23-2.63）及门静脉癌栓（HR=2.26，95%CI：1.14-3.29）均为独立预后因素，提示VEGF高表达与较差预后相关，是预测患者生存的重要指标。

3讨论

原发性肝细胞癌是全球范围内导致癌症相关死亡的主要原因之一。其发病率与死亡率在全球持续上升，尤其在慢性乙型或丙型肝炎病毒感染、长期酗酒及非酒精性脂肪性肝病等高风险人群中更为显著。早期诊断和及时治疗对于改善患者的生存率至关重要，然而，由于症状不明显且缺乏特异性的生物标志物，许多患者在确诊时已处于晚期阶段，错过了最佳治疗时机。血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）作为一种关键的促血管生成因子，在肿瘤的生长、侵袭和转移过程中扮演着重要角色。VEGF通过促进新生血管形成，为肿瘤提供必要的营养和氧气，从而支持肿瘤的发展[4]。

本研究显示，原发性肝癌患者的血清VEGF水平显著高于良性肝病组，且肿瘤组织中VEGF的阳性表达率也高于癌旁组织，这与国内外多项研究结果一致。理论上，肿瘤生长和转移高度依赖新生血管形成，而VEGF是目前所知最强、最特异性的促血管生成因子[5]。在肝癌发生发展过程中，由于肝癌细胞快速增殖和代谢活跃导致局部缺氧，从而诱导VEGF高表达。VEGF通过与其受体结合激活如PI3K-Akt、MAPK等下游信号通路，促进血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成，为肿瘤提供必要的血液供应，并增加血管通透性，促进肿瘤细胞迁移和侵袭[6]。

从临床角度来看，血清VEGF水平及肿瘤组织VEGF阳性表达率的升高，可作为肝癌诊断的重要参考指标。尤其对于慢性乙肝、丙肝患者或肝硬化患者等高危人群，检测血清VEGF有助于早期发现肝癌。当影像学检查难以明确肝脏占位性病变时，结合组织VEGF表达情况，可以提高诊断准确性。此外，治疗过程中VEGF水平的变化也可反映治疗效果，若持续升高则提示肿瘤可能复发或进展。尽管甲胎蛋白（AFP）是目前临床上最常用的肝癌诊断标志物之一，但其存在局限性：约30%-40%的肝癌患者AFP不升高，即AFP阴性肝癌易被漏诊；同时，在某些良性肝脏疾病中AFP也可能升高，造成假阳性。相比之下，VEGF在肝癌诊断中展现出独特优势[6]。本研究显示，部分AFP阴性的肝癌患者血清VEGF水平显著升高，表明VEGF可作为AFP阴性肝癌诊断的补充指标。VEGF直接反映了肿瘤的血管生成状态，更直观地展示了肿瘤生物学行为。

为了提升肝癌早期诊断的准确性，将VEGF与其他指标如AFP联合应用具有重要意义。研究表明，AFP、VEGF和胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ)联合检测原发性肝癌，能显著提高敏感性、特异性、准确性和阳性预测值[7]。有研究指出，血清VEGF和p53抗体联合AFP检测，可增强对原发性肝细胞癌的诊断效能，特别是在AFP阴性病例中，VEGF和p53抗体显示出较高的阳性率[8]。联合检测能够从不同角度反映肝癌的生物学特征，弥补单一指标的不足，提高诊断的敏感性和特异性[9]。在实际临床操作中，根据患者具体情况合理选择联合检测指标，可以为肝癌早期诊断提供有力支持[10]。未来的研究应进一步探索VEGF与其他新型肿瘤标志物的联合应用，以期进一步提高肝癌诊断的准确性和可靠性。

总之，通过检测血清和组织中的VEGF表达水平，可以较为准确地判断患者的病情严重程度及预后情况。此外，VEGF作为独立预后因素的地位得到确认，临床应用前景广泛。

参考文献

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基金项目：河南省高等学校重点科研项目，项目名称：原发性肝癌血管分化及形成与 VEGF 和 CD34 的相关性研究（项目编号：23B310011）

作者简介：马丽亚（1982 年 1 月），女，回，河南商丘，本科，病理学与病理生理学教研室，讲师，研究方向 : 病理学与病理生理学理论教学。