CTCs在局部晚期⻝管鳞癌放化疗的价值研究

摘要：目的 探讨CTCs在局部晚期⻝管鳞癌放化疗的价值。方法 筛选本院收治的60Ⅱ-Ⅲ期食管鳞癌患者作为观察对象，采集患者治疗前以及随访时的外周血，探讨CTCs于食管鳞癌患者预后的相关性。结果 治疗后一个月患者CTCs值显著降低，P<0.01；CTCS阴性总生存期及无病生存期高于CTCs阳性患者，P<0.01；COX回归结果显示，CTCS是影响食管鳞癌OS的因素，CTCs阴性组治疗效果显著优于阳性组，P<0.01。结论 CTCs是局部晚期食管癌患者预后的独立影响因素，可通过CTCs预测局部晚期食管鳞癌患者的治疗效果，对患者的预后有重要价值。

关键词：CTCs；局部晚期⻝管鳞癌；放化疗

中图分类号：R-012

前言

食管癌是我国死亡率较高的消化道肿瘤疾病，预后差且生存率低。食管癌早期症状缺乏典型性，患者就诊时多已发展为中晚期，容易出现骨转移、肺转移症状，疾病累及多个器官，严重威胁患者的生命安全。我国食管癌患者种类多为鳞癌，存在性别、地区和亚型的差异[1]，因此需要针对患者的发病类型及特点进行治疗。局部晚期食管鳞癌是指肿瘤已经较深的侵犯食管壁，仅仅存在少数的周围淋巴结转移，并无远处转移发生，此时的患者可采取根治性手术治疗或者放化疗同时进行的方案。根治性手术能够切除全部的病灶，但是手术中会切除患者的食管，影响术后患者进食及消化功能，同时有发生肺炎、吻合口狭窄等并发症的风险，疗效欠佳[2]。放疗可以直接消除食管癌局部的肿瘤细胞，可通过化疗增强放疗的敏感性，同时化疗药物可以在一定程度上抑制潜在的转移病灶，联合放化疗治疗对远处转移或者淋巴结转移范围较大的患者具有较大的优势。但是在临床实际治疗中，局部食管鳞癌的预后仍然受到肿瘤复发和转移的影响[3]，部分癌症细胞对化疗不敏感，即使在化疗时表现为完全缓解的症状，仍然会出现微转移病灶。放疗照射剂量是影响放疗效果的主要因素，为避免放射危及周围的健康器官，应限制放疗剂量，但是剂量不足和放疗范围覆盖不全又导致局部复发或远处转移风险增加。因此早期判断食管鳞癌的复发转移风险，对监测癌症病情变化以及及时治疗有重要意义。循环肿瘤细胞（CTCs）是由肿瘤细胞经原发灶或转移灶脱落进入外周血液形成的[4]，研究表明CTCs在ESCC中与预后预测、复发转移风险的评估以及治疗效果的判断等密切相关[5-6]。为进一步证实CTCs与局部晚期⻝管鳞癌放化疗结局的相关性，为临床局部晚期食管鳞癌患者的治疗提供参考依据，本文针对Ⅱ-Ⅲ期食管鳞癌患者的CTCs变化及治疗效果进行研究，具体如下。

1.资料和方法

1.1患者的一般资料

试验对本院2021年1月至11月收治的60例Ⅱ-Ⅲ期食管鳞癌患者进行调查研究，统计患者的基线资料及治疗后数据，患者的一般资料如下。

纳入标准：（1）经组织学认定的原发性食管鳞癌患者；（2）有可测量病灶；PS评分0～2分；（3）预估生存期大于3个月；（4）组织来源于患者肿瘤组织，并有完整病理学诊断数据；（5）签署知情同意书。

排除标准：（1）病历资料不完全的患者；（2）不配合无法完成取样；（3）受试者有多种肿瘤发病史，严重的心脑血管疾病；（4）6个月内进行过心脏支架手术或因心脑血管疾病入住过ICU、CCU等急重症病房或心功能EF≤50%；（5）受试者在3个月内患有严重的血管病变、肺结核及大面积急性炎症及处于活动期的慢性感染。

剔除标准：（1）试验过程中发现有不符合试验方案者；（2）试验期间发现有其他原发肿瘤者；（3）中断治疗，无法评价疗效者。

1.2方法

（1）采血。分别在治疗前1—3天（baseline基线、治疗前）、治疗后1个月，收集患者的外周血标本，每8—10ml。告知采血的步骤和方法，取得患者配合，准备采血器材。指导患者取坐位，选择合适的肘前静脉，遵循无菌操作的原则进行穿刺和采血，连接真空采血管，轻柔颠倒混匀采血管。

（2）CTC检测。仪器为中国华大基因（BGI）生产的CytoSorter®微流控CTC检测系统。将血样标本再采血后4小时内送至实验室，将血样标本转移至专用的检测试管，加入免疫磁珠，室温放置3小时，使用磁力架分离磁珠-CTC复合物，弃去未结合细胞，用洗涤缓冲液清洗3次，去除残留红细胞和白细胞。随后进行CTC染色与鉴定，选用DAPI、CK-PE、CD45-APC等染色试剂。将富集的细胞重悬，加入CK、CD45抗体及DAPI，避光放置20分钟。离心后取下层物质，用PBS重悬细胞。

1.3观察指标

观察CTCs动态变化情况，统计治疗前及随访时的CTCs值。根据CTCs值是否=0进行分组，对比两组患者的基本信息及疾病相关特征，对比患者总生存期（OS）及无病生存期（PFS）。放化疗结束后、结束3个月、6个月、12个月后进行疗效评价（肿瘤完全消失，肿瘤未完全消失，肿瘤无变化或进展）。记录其定期复查的影像学资料至疾病进展或至随访周期结束，根据RECIST标准进行疾病的疗效评价，计算客观缓解率ORR。计算无病生存期PFS，至疾病进展时间TTP（随访时间1年）。包括完全缓解CR，部分缓解PR，疾病稳定SD，和疾病进展PD。

1.4统计学方法

使用SPSS27.0软件进行数据统计分析，符合正态分布的计量资料用均值±标准差表示，两组间CTCs值、总生存期（OS）及无病生存期（PFS）等计量资料对比用独立样本t检验，计数资料用%表示，两组间治疗效果等计数资料用卡方检验。三个随访时间点的CTCs值对比采用单因素anova检验，若存在显著差异性则进一步进行两两比较事后检验。采用COX回归模型统计影响患者OS的影响因素，以P<0.05为存在统计学差异。

2.结果

2.1CTCs变化情况

治疗后一个月患者CTCs值显著降低，P<0.05，见表3。

2.2不同CTCs总生存期及无病生存期对比

随访时有39患者CTCs清零，21仍有CTCs检出，CTCS阴性总生存期及无病生存期高于CTCs阳性患者，P<0.05，见表3。

2.3影响食管鳞癌OS的影响因素

COX回归结果显示，CTCS是影响食管鳞癌OS的因素，见表4。

2.4CTCs与治疗效果的相关性

CTCs阴性组治疗效果显著优于阳性组，不同CTCs检出患者随访3、6、12月疗效比较见表5。

3.讨论

食管癌作为我国人群的高发肿瘤，具有恶性程度高、预后差、死亡率高的特点，晚期食管癌患者多见转移和复况，国外食管癌多为腺癌，而我国多为鳞癌，因此国外针对食管癌疾病的治疗方案指南[7]并不适用我国食管癌患者。联合放化疗能够有效地消除患者体内的癌症细胞，在放疗药物的作用下患者复发率和死亡率降低，预后得到一定的改善。查阅相关文献可知[8]，在多数癌症患者体内常检出循环肿瘤细胞，患者常常合并复发或者肿瘤转移的症状，循环肿瘤细胞的出现是远处转移关键标志，实体瘤原发病灶扩散进外周血中可形成循环肿瘤细胞，在肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤患者的预后评价和疗效分析中发挥着至关重要的作用。

本研究结果表明，在局部晚期食管鳞癌患者的同步放化疗治疗中，部分患者外周血中可检出循环肿瘤细胞。治疗后一个月患者循环肿瘤细胞高于治疗前，CTCs的显著下降可反映同步放化疗对肿瘤细胞的杀伤作用，提示治疗有效，治疗后一个月患者的症状均有不同程度的改善。

本次研究中共31例患者CTCS检出阳性，对比患者的总生存期及无病生存期可发现，阳性患者的生存期少于阴性患者，这证明CTCs与患者总生存期及无病生存期之间存在一定的相关性，且COX回归结果可知CTCS是影响食管鳞癌OS的因素，因此可通过观察患者CTCS变化情况预测患者的生存期限，采取针对性的治疗干预措施。这一点与ShuyuW[9]等学者的研究结果相同，不同CTCS患者的总生存期以及无病生存期存在差异，在临床治疗中可动态监测患者外周血中CTCs值来预测患者的病情变化，对改善患者预后和结局有重要意义。

本研究对患者治疗后3个月、6个月及治疗后12个月的治疗效果进行统计分析，结果显示CTCs阳性患者最终生存结局均为死亡，CTCs阴性患者的完全缓解、部分缓解情况优于CTCs阳性患者。疗效分析可知在放化疗治疗初期，患者的完全改善率增加，与CTCs的变化趋势相符。部分患者经治疗后CTCS清零，治疗效果显著，但是一些患者的CTCs值仍可检出，这表明患者出现复发、转移的情况。CTCs阴性与预后良好之间存在强相关性，当临床患者外周血中未检出CTCs时可证实患者同步放化疗治疗有效，可延续治疗方案。而CTCS阳性患者多见疾病稳定和疾病进展，这表明患者的预后较差，提示当前的治疗方案如放化疗治疗无法改善患者症状，需要及时调整治疗方案，选择强化治疗或者免疫联合化疗等方案进行治疗，且更换治疗方案后仍需检测患者体内的CTCs动态变化情况。对于随访期间CTCS持续阳性的患者，应加强关注，尽早进行干预治疗，避免恶性结局。

综上所述，CTCs可用于预测局部晚期食管鳞癌患者的放化疗效果和预后，CTCs阳性与不良治疗结局、癌症复发转移之间存在相关性，CTCs清零可评价当前治疗方案的有效性，判断患者总生存期以及无病生存期，有助于及时调整患者的治疗方案以及评估患者预后情况。

参考文献

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作者简介：胡海霞（1986-）,女,四川南充人，汉族，中级职称，研究方向食管癌放化疗。

单位名称：阆中市人民医院基金项目 ： 南充市应用技术研究与开发专项项目(自筹)， 基金编号21YFZJZC0010