实时荧光PCR检验用于乙肝病毒DNA检测的价值研究

【摘要】目的：探讨在乙肝病毒DNA检测过程中运用实时荧光PCR检验方法的临床价值。方法：2021年2月-2024年10月，将某医院接收348例乙肝病毒携带者选做调查对象，运用规范化操作步骤采集获取入选患者的血清检验标本，运用ELISA检验方法开展定性检测过程，运用实时荧光PCR检验方法开展定量检测过程，将血清标志物的检测次序设置成：①HbsAg物质；②HbsAb物质；③HbeAg物质；④HbeAb物质；⑤HbcAb物质，测算对比两种检验技术方法的检测数据结果一致性。结果：将ELISA检验方法检测数据结果视作对照数据，本项实时荧光PCR定量检测过程中，有330例患者为优，有14例患者为良，有4例患者为差，优良率测算数值为98.90%。在本项调查选取的14种乙肝检验模式中，大三阳患者的HBV-DNA物质阳性检出率测算数据值显著高于其他组别（P＜0.05）。结论：借由运用实时荧光PCR检验技术方法，能够迅速而又准确地反映揭示人体遭遇的乙肝病毒感染情形与复制情形，在客观评估分析病毒载量条件下，便利临床医生观察分析患者病情严重程度并且采取针对性措施开展治疗处置，且针对遭遇低复制水平持续感染病情的乙肝患者也能给出明确清晰的诊断结论。

【关键词】实时荧光PCR检验方法；乙肝病毒NDA检测；应用；临床价值；探讨

乙型病毒性肝炎疾病通常被简称为乙肝疾病，是在世界各国人口群体中均极其常见的慢性疾病，有部分统计数据显示，世界各国每年有超过100.00万例患者因乙肝病毒作用而发生临床死亡事件[1-2]。慢性乙肝病毒携带者数量占据世界人口总数量的10.00%之上，且超过总数量20.00%的急性乙型病毒性肝炎疾病患者会在病程持续时间逐步延长条件下转变成慢性乙型病毒性肝炎患者，且伴随着病情逐渐恶化，患者会继发肝硬化疾病甚至是肝癌疾病，由此不难理解，基于病程早期时间阶段做好针对乙型病毒性肝炎患者的诊断工作，在确保患者取得最佳病情治疗恢复效果方面，能发挥关键作用[3-4]。源于乙肝疾病的表现类型具备复杂性，临床医生在判断确定HBV感染患者的复制情况方面需要面对较大技术难度，且极易发生漏诊情况[5]。文章将348例乙肝病毒携带者选做调查对象，探讨实时荧光PCR检验方法用于乙肝病毒DNA检测的价值，报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料

2021年2月-2024年10月，将某医院接收348例乙肝病毒携带者选做调查对象，其中男性198例，女性150例，年龄介于15-73岁，平均（46.49±13.89）岁。

1.2检测方法

检测材料与检测设备为：①乙肝血清标志物检测试剂盒；②HBV-DNA检测试剂；③酶标仪设备；④PCR仪设备。

要运用规范化操作步骤采集获取入选患者的清晨空腹静脉血液检验样本5.00ml，将离心机设备的运行技术参数设置为3000.00r/min，针对血液检验样本实施离心处理，分离提取对应的血清检验样本，将血清检验样本放置到-20.00℃环境中保存，留待后续开展实验室检测技术过程。要在获取到所有入选患者的血清检验样本后，统一开展实验室检测过程。

运用ELISA检验方法开展定性检测过程，运用实时荧光PCR检验方法开展定量检测过程，将血清标志物的检测次序设置成：①HbsAg物质；②HbsAb物质；③HbeAg物质；④HbeAb物质；⑤HbcAb物质。

在ELISA检验方法与实时荧光PCR检验方法运用过程中，要严格遵从检测试剂盒的说明书内容执行各项技术操作步骤。

1.3临床观察指标

 测算对比两种检验技术方法的检测数据结果一致性。

1.4统计学方法

择选统计学软件包——SPSS25.0，计数资料卡方检验，计量资料秩和检验，P＜0.05，组间有差别。

2结果

2.1整体检验结果测算

将ELISA检验方法检测数据结果视作对照数据，本项实时荧光PCR定量检测过程中，有330例患者为优，有14例患者为良，有4例患者为差，优良率测算数值为98.90%。

判定标准：①优：ELISA检验数据结果与实时荧光PCR检验数据结果完全一致，且借助实时荧光PCR定量检验技术方法能够获取到相对更准确的检验数据结果，特别是针对乙肝大三阳患者、乙肝小三阳患者具备相对更高水平的拷贝数量；②良：ELISA检验数据结果与实时荧光PCR检验数据结果存在较少差异性，并且实时荧光PCR定量检验技术方法运用过程中获取的检验数据结果不会呈现出突出表现；③ELISA检验数据结果与实时荧光PCR检验数据结果存在大幅度差异。优良率=（优患者例数+良患者例数）/患者总例数×100.00%。

2.2对比分析结果

在本项调查选取的14种乙肝检验模式中，大三阳患者的HBV-DNA物质阳性检出率测算数据值显著高于其他组别（P＜0.05）。详情参见表1：

表1  对比分析结果（n，%）

3讨论

HBV-DNA物质是判断分析乙肝病毒复制情况、活动行为与传染性强烈程度的关键检验指标项目，推进开展血清学检验技术活动过程尽管能够清晰揭示HBV-DNA物质的基本性质，但是无法给出定量检测数据，而在运用实时荧光PCR检验方法条件下，则能提供围绕HBV-DNA物质的定量检测数据[6-7]。

从临床价值角度展开阐释分析，检测乙肝病毒携带者的乙肝病毒DNA相关数据，能够帮助临床医生准确评估患者的病情严重程度，支持患者获取到及时有效的临床治疗处置[8]。

本次调查中，在50例乙肝病毒感染大三阳患者中，有48例患者具备HBV-DNA物质阳性检出情况，其拷贝数为（4.48±2.02）×107/ml，证实乙肝病毒感染大三阳患者具备较高水平的拷贝数量，并且与其他检验模式患者对比，乙肝病毒感染大三阳患者的拷贝量呈现出幅度显著的提升变化趋势。证实此类患者依然具备相对较高水平的病毒复制特性，其具备的传染能力值得关切。

对于204例乙肝病毒感染小三阳患者而言，在运用ELISA检验方法条件下，有72例患者检出HBV-DNA物质阳性，其拷贝数为（3.50±2.00）×105/ml，此项检验数值尽管低于乙肝病毒感染大三阳患者，然而此类患者也具备相对较高水平的病毒复制特性。

在36例①项，⑤项同时阳性患者中，有20例患者检出HBV-DNA物质阳性，其拷贝数为（1.91±0.54）×104/ml，处在相对较高水平，证实此类患者有较高可能性处在血清转换期进程中，或者是具备前C区突变情况。

在6例①项，②项，④项，⑤项同时阳性患者中，HBV-DNA物质阳性检出率为100.00%，证实此类患者机体内部尽管已经产生与乙肝病毒感染进程关联的抗体物质，但是依然具备病毒复制情况，客观上证实HbeAg的转阴情况与抗体物质的生成，并不等同于病毒复制进程的停止与强度减低。

本次调查中，在将ELISA检验方法检测数据结果视作对照数据前提下，实时荧光PCR定量检测过程中，有330例患者为优，有14例患者为良，有4例患者为差，优良率测算数值为98.90%。在本项调查选取的14种乙肝检验模式中，大三阳患者的HBV-DNA物质阳性检出率测算数据值显著高于其他组别（P＜0.05）。本项调查证实，借由运用实时荧光PCR检验技术方法，能够迅速而又准确地反映揭示人体遭遇的乙肝病毒感染情形与复制情形，在客观评估分析病毒载量条件下，便利临床医生观察分析患者病情严重程度并且采取针对性措施开展治疗处置，且针对遭遇低复制水平持续感染病情的乙肝患者也能给出明确清晰的诊断结论。

【参考文献】

[1]周美.乙肝病毒表面抗原检测中酶联免疫吸附技术的应用及假阳性影响因素分析[J].婚育与健康,2025,31(07):64-66.

[2]万强,赵波,王瑶瑶.血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV- DNA联合检测对HBV所致肝癌的诊断及预后预测价值[J].标记免疫分析与临床,2024,31(04):685-691.

[3]胡茜盼.CRISPR/Cas14a1工程化系统快速检测肺炎支原体和乙肝病毒方法的研究及应用[D].南华大学,2023.

[4]屈丽,赵波涛.乙肝病毒前S1蛋白及其抗体与血清标志物联合检测在小儿乙肝早期诊断中的价值[J].中国妇幼保健,2023,38(04):661-664.

[5]罗纯生,展秀君.化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附试验法检测乙肝病毒感染标志物比较[J].医学信息,2022,35(09):175-177.

[6]漆国春.健康体检育龄妇女乙肝病毒感染检测结果分析及预防管理对策研究[J].人人健康,2021,(15):76-77.

[7]秦强国,张国平,李瑞丽.混样核酸检测联合酶免法筛查献血者乙肝病毒感染的残余风险分析[J].中国实验诊断学,2021,25(05):698-701.

[8]闫慧,李鹏,韩素丽,等.亚辉龙iflash3000A化学发光仪检测乙肝病毒血清标志物性能评价[J].临床医药实践,2021,30(03):193-194+211.