酶联免疫法筛查HIV抗体在艾滋病诊断中应用价值分析

摘要：目的：进行酶联免疫法筛查HIV抗体在艾滋病诊断中应用价值分析。方法：筛选2022年1月-2023年1月100例筛查HIV抗体的患者，分别应用胶体层析法、酶联免疫吸附法进行筛查，并通过免疫印迹法进行复检，并作为金标准参考，观察酶联免疫法的筛查HIV抗体的效能指标以及阳性样本带型分布。结果：免疫印迹法检验阳性35例，酶联免疫吸附试验显示阳性34例，胶体层析法显示阳性33例，酶联免疫吸附试验的准确度、灵敏度、特异度、假阳性、假阴性率高于胶体层析法（P<0.05），阳性样本带型分布显示gP160、gP120出现率高达100%，然后是P24、gP41，出现率97.06%，P51和P66出现率为94.12%。结论：酶联免疫法筛查HIV抗体可以快速且准确地诊断艾滋病，推荐首选酶联免疫法筛查，有助于提高艾滋病诊断效率，还能显示阳性样本带型的分布，也为临床快速识别和诊疗提供重要帮助。

关键词：酶联免疫法；HIV抗体；艾滋病；诊断价值

艾滋病是通过性行为以及血液传播、母婴传播为途径的一种人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的高传播性的传染疾病，在全球范围内发病率高，传播范围广泛。特别是经济不发达的贫困地区以及发展中国家发病更加呈现流行状态，由于人们的经济水平以及健康意识有限，卫生行为不规范，导致艾滋病的传播率较高[1]。现医疗手段中对于艾滋病还并无特效治疗方案，只是通过抑制病毒复制、提高免疫力、改善症状和预防并发症为主，减少其传播的风险。早期进行诊断和治疗，能够有效地控制病毒在体内的复制数量，从而降低传播率，还能延缓病情的发展，减少病毒对免疫系统的攻击，对于控制其流行趋势有核心的作用[2]。在艾滋病的临床诊断中，进行HIV抗体检测是判断疾病阳性的重要标准，包括初筛和确诊试验，初筛中检验方法的准确性和快速性、敏感性可直接影响检验结果的精确性。临床在艾滋病患者的初筛诊断中主要采用酶联免疫吸附试验以及胶体层析法等，可以迅速地识别出大多数的艾滋病感染者。胶体层析法的优势在于操作流程简单快速，结果等待时间短，更符合急诊HIV抗体检测的迫切需求，但是胶体层析法结果准确性的影响因素较多，降低诊断的准确性，存在假阳性以及假阴性的局限，并不绝对的可靠。随着酶联免疫吸附试验的广泛应用，临床发现该检验技术的准确度和敏感性均比较高，能够有效地进行诊断，在提高初筛诊断准确性以及降低疾病负担中发挥关键作用[3]。本研究旨在进行HIV抗体的酶联免疫法研究，观察其在艾滋病患者诊断中的价值，以早期指导临床治疗，降低相关死亡率。

1资料与方法

1.1一般资料

筛选2022年1月-2023年1月100例筛查HIV抗体的患者，共包括男性58例，女性42例，29-55岁，平均（38.58±1.25）岁，伦理委员会对本次研究的方案进行严格审核后参考相关法律法规认为不涉及伦理问题，符合研究要求；所入组的受检者具有HIV携带者的接触史或不良性生活史等HIV的危险患病因素，且所有患者知情且同意，医护人员在做好防护工作下接触样本；排除具有其他传染病者、免疫治疗史者、先天免疫缺陷者以及重要脏器功能不全者、血液疾病者。

1.2方法

检查前的准备工作，所涉及的仪器和物品包括：KPS-KM化学发光仪、酶标仪、洗板机和取样器，检查前进行设备的调试和维护，校准其性能保持能够良好准确地运行；具体的检查方法：患者保持8小时的禁食，在清晨空腹状态下抽取肘静脉血液样本，共6毫升，离心处理，相关参数为每分钟3000转；3厘米离心半径，共处理5分钟，检验上清层血液，采

通过基因工程技术制造HIV-1和HIV-2抗原，将其滴入预先涂覆或“包被”有HIV抗原微孔板中，形成固相抗原，然后加入HRP标记的抗原，观察颜色变化，之后采用酶联免疫吸附法进行HIV的标记二抗检测，结合固相抗原的抗体，加入酶底物，观察颜色变化，HIV抗体越多，那么颜色也越深，酶标仪检测OD值，观察是否为阳性结果。胶体层析法是通过观察HIV-1和HIV-2抗原与硒胶体-抗原结合，结合后固相抗原会试剂显示区固定，呈现红线，则显示是阳性。

为提高研究准确度、可靠度，减少主观因素影响，均由同一组采血人员和实验室人员操作，研究开始前进行专业培训和考核，确保其根据实验室标准操作规程准确规范操作，定时清洁实验室环境，保持无菌、清洁。

1.3观察指标

（1）检验结果；（2）诊断结果对比；（3）阳性样本带型分布观察。

1.4统计学方法

统计学处理软件SPSS20.0，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间差异性比较采用独立样本t检验，采用百分比（%）表示计数资料，组间差异性比较采用x2检验，当P<0.05时视为差异有统计学意义。

2结果

2.1检验结果

免疫印迹法检验阳性35例，酶联免疫吸附试验显示阳性34例，胶体层析法显示阳性33例。见表1.

表1检验结果（n，%）

2.2诊断结果

酶联免疫吸附试验的准确度、灵敏度、特异度、假阳性、假阴性率高于胶体层析法（P<0.05）。见表2.

表2诊断结果（n，%）

2.3阳性样本带型分布观察

阳性样本带型分布显示gP160、gP120出现率高达100%，然后是P24、gP41，出现率97.06%，P51和P66出现率为94.12%。见表3.

表3阳性样本带型分布观察（n，%）

3讨论

艾滋病是一种致死性的慢性传染疾病，具有传染性强、传播率高、死亡率高、慢性发展、不可治愈等疾病特点，HIV能在人体的血液、精液以及乳汁和阴道分泌物中长期存在，因此其感染途径主要通过性生活、哺乳、静脉注射等血液接触进行传播。我国目前的艾滋病发病流行性趋势逐渐升高，且年轻化，青少年群体病例增多，感染HIV会损害免疫功能，造成免疫功能缺陷，主要是因为该病毒会侵犯和破坏免疫细胞CD4+T淋巴细胞，引起免疫系统的不同程度损伤和缺陷，从而引起相关机会性感染和肿瘤疾病等，具有较高死亡率[4]。

当前艾滋病还无治愈药物，只能通过加强预防以及针对感染者进行系统化、规范化的相关抗病毒治疗，比如抗逆转录病毒疗法，来延长生存期、控制病毒复制、延缓病情发展，改善生活质量等。艾滋病的预防和诊断以及治疗的及时性和有效开展也是全社会的责任，是控制艾滋病发展的重要策略。艾滋病的临床筛查工作目前依赖于HIV抗体检验，试验方法较多，常见的有酶联免疫吸附法和明胶颗粒凝集试验和放射免疫沉淀试验等方法，其中免疫印迹试验作为诊断性的方法始终为临床诊断的金标准参考，而其他不同的初筛方法中也有不同的诊断准确性和特异度等效能差异，从而影响后续的治疗以及患者的健康，有特殊的临床作用，所以选择一种准确且有效的初筛方法在该病的诊断和治疗中有关键的意义[5]。基于HIV抗体的窗口期特点，不同患者的个体身体素质差异，窗口期时间各不相同，所以世界卫生组织认为，进行艾滋病HIV抗体初筛的标准应该同时具备准确、快速以及高特异性、敏感性的优势，便于直观快速地观察抗体检测结果[6]。

免疫印记法在初筛阳性样本的确诊诊断中有着重要的作用，检测特定的HIV蛋白条带来对初筛的结果进行验证，特异性高，但是其应用还存在一些局限，导致其作为初筛方法仍有不足之处，比如免疫印记法的操作较为复杂，对操作人员的技术以及设备的精确都有极高的要求，并且免疫印记法的检验过程耗时长，试剂成本较高，不适合用于大面积以及紧急情况下的HIV抗体筛查[7]。相比之下，胶体层析法的检查费用虽然有所下降，但是其敏感性和特异性，相对较低，容易出现漏诊以及误诊的可能。

酶联免疫吸附试验在艾滋病的诊断中有着重要的作用，具有较高的特异性和敏感性，通过验证血液中HIV抗体来进行初筛的诊断。其操作方法是将基因工程技术制造的HIV1和2的抗原包被在固相载体中，通过酶标记反应来观察HIV抗原底物显色的情况，通过酶标仪进行检测，观察酶催化底物反应，当HIV阳性底物就会变色[8]。有研究对其临床优势有所指出，发现其稳定性较好，受干扰因素较少，不会因为溶血以及血脂等因素而导致结果变化，并且对实验室环境要求低，室温下可进行，在便捷性上可以多份样本同时进行检测[9]。酶标仪统一读取数据，从而减少温度以及读取数据时间和标本处理时间对结果准确性的影响，对于急诊HIV抗体检测中可以批量检验，从而增加结果的准确性，易于辅助临床诊断参考[10]。

本研究针对HIV抗体的检测应用免疫印迹法、酶联免疫吸附试验、胶体层析法，观察结果：免疫印迹法检验阳性35例，酶联免疫吸附试验显示阳性34例，胶体层析法显示阳性33例，酶联免疫吸附试验的准确度、灵敏度、特异度、假阳性、假阴性率高于胶体层析法（P<0.05），阳性样本带型分布显示gP160、gP120出现率高达100%，然后是P24、gP41，出现率97.06%，P51和P66出现率为94.12%，提示酶联免疫吸附法在HIV抗体检验中应用价值高，诊断效能高，但是其敏感度和特异度并不绝对，有假阴和假阳可能性，考虑可能与类风湿因子以及手工操作步骤繁琐等因素有关，所以在酶联免疫吸附试验初筛阳性结果后需要进行确认试验，来提高准确结果的验证性；同时还需要增加对操作者培训和环境等质控手段，严格筛选高质量、权威厂家的试剂，以减少影响结果干扰因素。另外，本次结果还针对HIV抗体阳性患者的条带显示情况进行了结果统计，发现gP160、gP120、P24、gP41、P51和P66是较为活跃的几种带型，提示可以对此带型的阳性HIV抗体患者加强监测，以为控制传播风险提供科学指导。

综上所述，酶联免疫法筛查HIV抗体的准确度较高，还能显示抗体带型的分布，可以作为其诊断的初筛首选方法，推荐使用。

参考文献：

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