- DOI:
10.13738/j.cnki.acc.qklw60536
- 专辑:
科学Ⅰ辑;信息科技
- 专题:
信息、科学;综合科技
- 分类号:
G90;N92
[摘要]目的:拟对影响BH5300型原子吸收光谱仪检测结果准确性的因素进行探究,以期找出导致检测结果不准确的原因,并采取有效措施,保证检测结果的准确性,为临床提供正确、客观的评价指标。方法:通过二组实验,A组,使用加样枪吸头、一次性微量采血吸管吸取同个血常规标本,然后进行检测,对结果进行分析比较。B组,使用重络酸钾清洁液处理过的微量吸血管,与未经处理过的微量吸血管进行比较。结果:第一组实验结果显示,加样枪吸头、一次性微量采血吸管对Zn和Cu元素测定测定结果均有差异(P<0.05),而Mg、Ca、Fe元素测定结果无差异(P>0.05)。第二组实验结果显示,用经处理和未处理的微量采血吸管采血Zn、Cu的测定结果有显著性差异(P<0.05),而Fe、Ca、Mg测定结果无显著差异(P>0.05)。结论:不同微量采血吸管,及未经处理的微量采血管对微量元素测定结果有一定影响。同一实验室在进行全血微量元素检测时应制定一个标准操作规程,并且照规程操作。在选取微量采血吸管时应选择同一品牌的微量采血管,采血管的容量应经抽检合格,并经重络酸钾清洁液处理后使用,可保证检测结果具有较高的可靠性。
关键词:微量元素 微量吸管 原子吸收光谱仪
随着人民群众的生活水平不断提高,身体健康、营养水平,尤其是儿童营养状态受到越来越多的关注。微量元素检测是一项评价儿童营养水平的重要指标,也是儿童保健常规检查项目。目前,我国各级医疗卫生事业单位,尤其是妇幼保健院、儿童保健院、综合性医院等都已将人体微量元素的检查作为常规检测项目。因此准确地检测人体内各种微量元素的水平,对于疾病的诊断、治疗和预防,具有极其重要的作用[1]。但在日常检测过程中,我们发现其检测结果易受到各种因素的影响,导致其结果忽高忽低,很不稳定,难以保证检验报告的质量,不能为临床提供准确、客观的评价指标。尽管在各级医疗保健单位检测过程中都已注意到了该问题,且采取了很多办法来解决在检测过程中出现的问题。但到目前为止,还没有一个有效地的方法排除检测过程的干扰因素。为此,本文拟用BH5300型原子吸收光谱仪,检测Cu、Zn、Ca、Mg、Fe五种元素,探究影响微量元素检测的因素,以期找出导致检测结果不准确的原因。并采取有效措施,保证检测结果的准确性,为临床提供正确、客观的评价指标。现报告如下。
1.资料与方法
1.1 资料 收集来源于我院检验科门诊含有EDTA-K2抗凝的血常规标本10份。 标本收集时要注意:①尽量选择正常人的血常规标本。②标本应做好收集登记、注明标本存放位置及标本处理情况。③标本有凝块和采血量(40ml)不足为不合格标本,需重新采集标本。
1.2 方法 使用博晖BH5300原子吸收光谱仪,逐一检测二组待检标本。并记录相关检测数据。
2.结果
二组实验结果见表1-表3。
表1 不同微量吸血管对微量元素检测结果的影响
测试 项目 | Cu(umol/L) | Zn(umol/L) | Ca(mmol/L) | Mg(mmol/L) | Fe(mmol/L) | ||||||||||
样本号 | 加样枪 | A家 吸管 | B家 吸管 | 加样枪 | A家 吸管 | B家 吸管 | 加样枪 | A家吸管 | B家 吸管 | 加样枪 | A家 吸管 | B家 吸管 | 加样枪 | A家 吸管 | B家 吸管 |
1 | 10.25 | 10.25 | 12.68 | 116.15 | 120.89 | 165.45 | 1.40 | 1.41 | 1.81 | 1.54 | 1.59 | 1.60 | 7.29 | 7.59 | 7.67 |
2 | 9.76 | 10.25 | 11.71 | 116.62 | 122.31 | 165.93 | 1.39 | 1.41 | 1.63 | 1.54 | 1.61 | 1.61 | 7.33 | 7.69 | 7.73 |
3 | 7.32 | 9.27 | 14.64 | 116.62 | 118.52 | 165.93 | 1.45 | 1.40 | 1.67 | 1.59 | 1.58 | 1.77 | 7.53 | 7.81 | 8.44 |
4 | 7.81 | 8.78 | 12.68 | 115.68 | 119.47 | 164.16 | 1.45 | 1.42 | 1.69 | 1.59 | 1.60 | 1.80 | 7.54 | 7.86 | 8.54 |
5 | 8.78 | 9.76 | 12.68 | 114.73 | 120.89 | 165.59 | 1.53 | 1.44 | 1.85 | 1.59 | 1.63 | 1.89 | 7.49 | 7.78 | 7.85 |
6 | 9.27 | 8.78 | 10.25 | 112.83 | 121.84 | 151.36 | 1.54 | 1.45 | 1.74 | 1.61 | 1.65 | 1.72 | 7.58 | 7.90 | 7.62 |
7 | 7.32 | 8.78 | 10.29 | 114.73 | 122.79 | 160.89 | 1.43 | 1.45 | 1.63 | 1.59 | 1.63 | 1.85 | 7.56 | 7.20 | 7.87 |
8 | 10.25 | 8.78 | 11.81 | 114.25 | 123.73 | 160.89 | 1.44 | 1.46 | 1.54 | 1.60 | 1.65 | 1.85 | 7.64 | 7.29 | 7.48 |
9 | 7.81 | 9.27 | 11.71 | 114.25 | 118.05 | 167.57 | 1.48 | 1.35 | 1.50 | 1.57 | 1.51 | 1.72 | 7.47 | 7.63 | 8.36 |
10 | 9.76 | 9.27 | 12.20 | 114.73 | 117.57 | 161.84 | 1.50 | 1.36 | 1.67 | 1.58 | 1.52 | 1.75 | 7.53 | 7.59 | 8.49 |
p | >0.05* <0.05# <0.05$ | <0.05* <0.05# <0.05$ | <0.05* <0.05# <0.05$ | >0.05* <0.05# <0.05$ | >0.05* <0.05# <0.05$ | ||||||||||
注:* 加样枪与A家吸管比较;#加样枪与B家吸管比较;$A家吸管与B家吸管比较。
表2 处理前后的采血吸管对微量元素检测结果的影响
测试 项目 | Cu(umol/L) | Zn(umol/L) | Ca(mmol/L) | Mg(mmol/L | Fe(mmol/L) |
样本号 | 处理前 处理后 | 处理前 处理后 | 处理前 处理后 | 处理前 处理后 | 处理前 处理后 |
1 | 10.25 8.25 | 120.89 116.62 | 1.41 1.38 | 1.59 1.57 | 7.59 7.51 |
2 | 10.25 6.83 | 122.31 116.62 | 1.41 1.38 | 1.61 1.58 | 7.69 7.57 |
3 | 9.27 9.76 | 118.52 114.21 | 1.40 1.39 | 1.58 1.57 | 7.81 7.54 |
4 | 8.78 8.73 | 119.47 115.16 | 1.42 1.40 | 1.60 1.60 | 7.86 7.66 |
5 | 9.76 8.78 | 120.89 118.99 | 1.44 1.39 | 1.63 1.57 | 7.78 7.55 |
6 | 8.78 7.81 | 121.84 118.05 | 1.45 1.40 | 1.65 1.59 | 7.90 7.57 |
7 | 8.78 8.78 | 122.79 114.16 | 1.45 1.41 | 1.63 1.58 | 7.20 7.59 |
8 | 8.78 6.83 | 123.73 116.53 | 1.46 1.40 | 1.65 1.60 | 7.29 7.67 |
9 | 9.27 9.76 | 118.05 119.94 | 1.35 1.40 | 1.51 1.62 | 7.63 7.70 |
10 | 9.27 8.29 | 117.50 118.52 | 1.36 1.42 | 1.52 1.63 | 7.59 7.78 |
P | <0.05 | <0.05 | >0.05 | >0.05 | >0.05 |
讨论
在实际工作,我们发现采用博晖BH5300原子吸收分光光度计测定全血五元素,同一患者不同次采样的测定结果重复性较差,尤其是锌和铜的测定结果的变异,往往不能用生物学变异来解释。本文通过本二组实验探讨不同采血管吸管、未经处理的采血管对全血微量元素的影响。第一组实验结果显示,采用定量加样枪一次性塑料吸头、A家一次性微量吸管和B家一次性微量吸管采样,Zn、Cu测定三种采血管的测定结果均有差异,而Fe、Ca、Mg测定结果无显著性差异。这可能是由于三种采样管的吸样量不同所致。由于血中Zn、Cu的含量非常微量,加样量对它们的影响更为显著,而Fe、Ca、Mg含量较高,加样量的误差对其测定结果影响不大。从定量角度看,因加样枪通过定量校准,采用塑料吸头的可靠性强,而微量采血吸管不可能做到每根吸管都通过定量校正,可靠性较差,同时也提示,采用不同采血吸管,测定结果会有差异。第二组实验结果显示,使用未处理和处理过后的微量采血吸管采血,Cu、Zn的测定结果有显著性差异,而Fe、Ca、Mg测定结果无显著差异,经处理的微量采血吸管采集的标本的测定结果较未经处理的结果低。说明,未经处理的微量采血管存在Zn、Cu污染的可能。
实验结果表明,不同微量采血吸管、未经处理的微量采血吸管对测定结果有影响。因此,在标本采集过程中应严格按照操作规程进行操作,准确采取。全血微量元素测定的样本采集,实际工作中为了方便多采用的微量采血吸管。而微量采血吸管并不是针对微量元素检测设计,而是针对血细胞分析而设计的。为了减少血小板的聚集,微量采血吸管常被硅化,即将硅油分散在乙醚与乙醇中,涂覆管壁晾干或烘烤,使管壁涂上一层硅化层,形成光滑的面。在硅化过程中,可由于用于硅化的硅油及辅助材料含有被测元素而影响测定结果;微量采血管因管径较细,需要较高的吹制工艺,严格控制才能获得管径一致的毛细吸管。如管径不一致可导致同批微量采血吸管的吸样量不准,从而影响测定结果的准确性,而且微量采血吸管的定量方法不可能是每根吸管都通过称重测定,这本身就会导致不同微量采血吸管间的吸样量的差异;由于微量采血吸管为玻璃制品,可因制作原料含有杂质,在制作、运输、保存过程中都有可能被污染,如不采取有效的去污染措施,也会对测定结果产生影响。因此,同一实验室在进行全血微量元素检测时应选择同一品牌的微量采血管,采血管的容量应经抽检合格,并经重络酸钾清洁液处理后使用,可保证检测结果具有较高的可靠性。
另外,实验检测过程中的操作不当也会影响检测结果,如燃烧器、雾化器、管路、等都会直接影响其检测结果的准确性和精密度。因此,应正确操作和维护保养仪器,使之工作正常。如:喷样前需颠倒5-10次,充分混匀后,透光观察样品中是否有沉淀或细小凝块;检查管路是否通畅;雾化器堵塞时应用银针及时疏通。当燃烧器缝口处形成无机盐结晶及黏附污物,出现锯齿状火焰时,应用柔软刀片或滤纸轻轻刮掉,以免损坏燃烧器[2];每次实验之前,都要对废液管进行检查,避免废液水面浸没废液管的出水端,造成雾化器室的积水,从而影响到检测结果等。
除此之外,微量元素在自然界中普遍存在,任何细微的内、外界因素都会影响到微量元素检测结果的可靠性[3]。分析者自身的化妆品、灰尘、油脂等都可以通过检测者玷污样品,导致空白值升高,尤其是分析者操作过程中所戴的手套[4]。因此在实验过程中应减少使用手套,尤其是橡胶手套,在使用一次性的PE手套时,也应及时更换,以减少实验过程中的污染。
4.结论
不同采血量、不同微量采血管及未经处理的微量采血管对测定结果有影响,同一实验室在进行全血微量元素检测时应制定一个标准操作规程,严格的按照规程进行操作。在选取微量采血吸管时应选择同一品牌的微量采血管,采血管的容量应经抽检合格,并经重络酸钾清洁液处理后使用,可保证检测结果具有较高的可靠性。
参 考 文 献
[1] 府伟灵,徐克前.临床生物化学检验全国高等学校教材(供医学检验专用)[M].第五版.北 京:人民卫生出版社,2012:122-125.
[2] 任瑞平.BH-5100五元素分析仪检测微量元素结果不稳定原因分析[J].国际医学检验杂志,2012,33(9):1150-1151.
[3] 刘素兰,张均梁华,等.肝素抗凝静脉血与直接手指血微量元素检测比较[J].微量元素与健康研究,2006,23(5):11-12.
[4] 袁育林,覃桂芳,杜武杰,等.实验用手套对Cu、Zn、Ca、Mg、Fe元素检测的影响[J].广东微量元素科学,2012,19(12):33-36.
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