猴头菇白及护胃颗粒对小鼠免疫功能影响

摘要：目的 通过实验研究猴头菇白及护胃颗粒对小鼠免疫指标的影响。方法 将不同剂量的猴头菇白及护胃颗粒以人体推荐量的30倍、10倍和5倍分为高、中、低剂量组（3.00g/kg体重、1.00g/kg体重 、0.50g/kg体重），给予小鼠连续灌胃30d。同时设阴性对照组，灌胃给予等量的蒸馏水。试验完成后，对小鼠的多项指标展开测定，包括体重、脏器与体重的比值、NK 细胞活性，还有体液免疫功能（具体测定抗体生成细胞数、血清溶血素）、细胞免疫功能（测定脾淋巴细胞转化能力、迟发型变态反应情况）以及单核-巨噬细胞功能（通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、小鼠碳廓清实验进行测定）。结果显示：相较于对照组，中剂量组和高剂量组小鼠的足跖肿胀度存在显著差别；将对照组与高剂量组小鼠在淋巴细胞增殖能力、碳廓清吞噬指数、腹腔巨噬细胞吞噬百分率以及吞噬指数方面进行比较，高剂量组小鼠的这些指标呈现出显著差异。因此，受试物组小鼠在细胞免疫功能以及单核-巨噬细胞功能方面呈现阳性结果。结论 猴头菇白及护胃颗粒可以增强机体免疫力。

关键词：猴头菇；白及；三七；免疫

中图分类号：R248

六腑理论是中医基础理论的关键构成部分，与现代免疫学有着密切的关系。中医六腑理论通过维持“传化通畅”“保障机体”“正气存内”，保障气血生化之源，维持气机升降出入，及时排出代谢毒素，从而实现调节免疫的作用。所以六腑的通降功能很重要，不能阻塞，否则会生病。胃，作为六腑的关键组成部分，被誉为“太仓”和“水谷之海”，是机体消化和吸收食物的关键器官。脾胃强健，气血生化有源，正气足，免疫力自然好。胃与脾共同位于中焦，二者在生理上相互关联、互为表里。胃的主要功能是接受并容纳食物，同时对其进行初步消化，使之转化为食糜，这一过程对人体的生命活动至关重要。

1 材料与方法

1.1 样品

猴头菇白及护胃颗粒，由本实验室自制。以猴头菇、白及经水提取，三七经70%醇提取所得提取液经浓缩、干燥得到的提取物粉，与辅料微晶纤维素、硬脂酸镁混合、制粒、干燥得到的颗粒剂，6g/袋，每日1次，每次1袋（折合猴头菇、白及、三七每日用量分别为5g、2g、2g）。

1.2 实验动物及分组

SPF级健康雌性ICR小鼠，体重介于18至22克之间，依据体重随机划分为四大实验组。第一组实验聚焦于对脏器与体重比例、迟发型变态反应、抗体生成细胞数检测以及血清溶血素水平展开评估；第二组实验开展碳粒廓清试验；第三组实验针对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力予以测试；第四实验组则开展小鼠淋巴细胞转化试验与自然杀伤（NK）细胞活性测定。每个大实验组内再细分为三个剂量小组及一个阴性对照组，每组12只动物。

1.3 实验方法

受试物分为高、中、低三个剂量组，具体剂量依次为3.00g/kg 体重、1.00g/kg 体重、0.50g/kg 体重，相当于人体推荐摄入量的30倍、10倍以及5倍。将受试样品溶解在蒸馏水中，使其达到相应所需的浓度，阴性（蒸馏水）对照组则给予等量蒸馏水灌胃。所有小组的小鼠连续30天，每天按20mL/kg体重的剂量进行灌胃处理，之后测定各项免疫学指标。

1.4 数据分析

运用SPSS软件对试验数据展开统计分析，具体采用多个实验组与一个对照组间均数两两对比的方式来实施比较。

1.5 结果判定

参照《保健食品功能检验评价方法》。

2 结果

2.1 样品对小鼠体重的影响

高、中、低剂量组与对照组的小鼠初始体重经比较，差异无统计学意义（p＞0.05），这表明小鼠初始体重在各组间分布较为均匀；各试验组小鼠与对照组相比较，体重增长均未表现出统计学上的显著差异（p＞0.05）。

表1  各组小鼠的初始体重

表1  （续） 各组小鼠的中期体重

表1  （续）  各组小鼠的末期体重

表1  （续） 对小鼠体重的影响

2.2 细胞免疫功能测定

2.2.1 样品对小鼠迟发型变态反应的影响

中剂量组、高剂量组小鼠与对照组相比，前两者的迟发型变态反应具有统计学意义的显著差异（p＜0.01或p＜0.05），结果见表2。

表2  对小鼠迟发型变态反应的影响

2.2.3 样品对小鼠淋巴细胞转化实验的影响

根据表3的数据,高剂量组小鼠与对照组比较，OD差值具备统计学意义（p＜0.05），表明该项实验呈阳性。

表3  对小鼠脾淋巴细胞转化实验的影响

2.3 小鼠脏器/体重比值、体液免疫功能测定

2.3.1 样品对小鼠脏器/体重比值的影响

根据表4的数据，与对照组相比较，各剂量组小鼠的测定值，均无统计学上的显著差异（p＞0.05）。

表4  对小鼠脏器/体重比值的影响

2.3.2 样品对小鼠抗体生成细胞数的影响

根据表5的数据，与对照组相比较，各剂量组小鼠的溶血空斑数均无统计学意义（p＞0.05），表明该项实验呈阴性。

表5  对小鼠抗体生成细胞数的影响

2.3.3 样品对小鼠血清溶血素的影响

根据表6的数据，与对照组相比较，各组小鼠的血清溶血素水平经统计学分析，差异均不显著（p＞0.05）。

表6  对小鼠血清溶血素的影响

2.4 单核-巨噬细胞功能测定

2.4.1 样品对小鼠碳廓清实验的影响

根据表7的数据，与对照组相比较，高剂量组小鼠的碳廓清吞噬指数，存在统计学上的显著差异（p＜0.05）。

表7  对小鼠碳廓清实验的影响

2.4.2 样品对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

根据表8的数据，与对照组相比，3.00g/kg·bw组的吞噬百分率、吞噬指数，经统计学分析p值小于0.05。

表8  对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响

2.5 样品对小鼠NK细胞活性的影响

根据表9的数据，与对照组相比较，各剂量组小鼠的自然杀伤（NK）细胞活性均无统计学上的显著差异（p＞0.05）。

表9  对小鼠NK细胞活性的影响

3 结论

实验结果表明，与对照组相比，中、高剂量组小鼠的迟发型变态反应，差异有显著性；高剂量组小鼠的脾淋巴细胞转化实验的OD值、碳粒廓清指数、腹腔巨噬细胞吞噬比例和腹腔巨噬细胞吞噬能力指数与对照组比较，差异有显著性；脾脏/体重比、胸腺/体重比、抗体生成细胞实验、血清溶血素实验以及NK细胞活性实验呈阴性。

4 讨论

猴头菇白及护胃颗粒中包含白及、三七、猴头菇。猴头菇味甘、性平，对心、肝、脾、肺、肾脏器有好处，有助于消化，补充身体亏虚、增强胃部功能，巩固身体根本，从原理上看，这意味着它可对消化器官的损伤予以修复，使得营养物质得以顺利吸收，进而输送至其他脏器，发挥出补益的功效，这与中医所秉持的“整体论”观点高度契合[2]。三七味甘、微苦，性温，归属胃经、肝经，具有散淤血、止血、消肿、缓解疼痛的功效，三七含有丰富的人参皂苷和三七皂苷。近年来，随着对这些皂苷的研究不断深入，大家对它们的了解也越来越全面。这些皂苷不仅有助于提升健康，还能带来许多益处，大众应对其有更深入的认识。梁勇[3]指出，三七的主要生理活性成分是三七总皂苷，它具备多种药理作用，比如能够扩张血管、减少心肌耗氧量、延长凝血时间，还可对免疫功能进行调节 。通过对不同部位总皂苷的溶血性和体外免疫活性的探讨，发现三七不同部位总皂苷安全性好，能促进细胞免疫和体液免疫。白芨是一种常用中药，其根茎富含多种活性成分，其中白芨胶是其主要有效成分。白芨胶又称白芨甘露聚糖、白芨多糖，这种物质是从白芨块茎中提取出来的。首先，将白芨块茎用水浸泡并煮沸，使其内部的有效成分溶解在水中，然后通过醇沉淀处理，去除杂质和不需要的成分，最终得到一种纯净的杂多糖。这种多糖具有独特的分子结构，含有丰富的葡萄糖、半乳糖和其他糖类成分。经多次实验验证，白芨多糖能够显著增强小鼠的非特异性及特异性免疫功能[4]。

本实验研究结果表明，猴头菇白及护胃颗粒的中剂量组与高剂量组，均能促使小鼠足跖肿胀度提升。其中，高剂量组不仅可强化小鼠脾淋巴细胞的增殖能力，还能增强细胞碳廓清吞噬能力以及腹腔巨噬细胞的吞噬能力，经与对照组对比，这些由中、高剂量组引发的变化呈现出显著差异。因此小鼠细胞免疫功能和单核-巨噬细胞功能为阳性，表明猴头菇白及护胃颗粒具有增强免疫力的功能。结合前期研究，该猴头菇白及护胃颗粒在辅助保护胃粘膜和增强免疫力方面均有作用。

参考文献

[1]韩晓伟,谭健,关洪全.浅析中医六腑学说与现代免疫的关系[J].辽宁中医杂志,2017,44(07):1388-1390.

[2]黄福东,何华奇.猴头菇外泌体和浸膏对乙醇性胃损伤的抗氧化作用[J].安徽科技学院学报,2020,34(03):22-29.

[3]梁勇,秦枫,唐肖雷.三七不同部位总皂苷溶血性及体外免疫活性研究[J].湖北农业科学,2011,50(23):4905-4907.

[4]邱红梅,张颖,周岐新,等.白芨多糖对小鼠免疫功能的调节作用[J].中国生物制品学杂志,2011,24(06):676-678.

作者简介：曹珍艳（1982—），女，汉族，湖北黄陂人，理学硕士，北京中蜜科技发展有限公司，中级工程师，研究方向为食品工艺。