逍遥颗粒的提取制备工艺优化及质量评价

摘要：目的 本研究旨在优化逍遥颗粒的提取与制备工艺，并对其质量进行评价。方法通过正交试验法对逍遥颗粒的水提工艺进行优化，以芍药苷含量和干浸膏得率的综合评分为评价指标，考察了浸泡时间、提取时间和加水量对提取效果的影响。同时，通过单因素试验考察了辅料与水的比例对制备工艺的影响。采用物理指纹图谱和化学特征图谱对物理属性指标和化学特征成分进行综合表征，以评价质量一致性。结果 逍遥颗粒的最佳水提工艺条件为浸泡30分钟后，首次加水10倍量，煎煮2小时；第二次加水8倍量，煎煮1小时。制备工艺优化为将两次煎液与蒸馏后的水溶液合并，浓缩至浸膏相对密度为1.315（40℃），加入372.50 g糊精及2.50 g甜蜜素，混匀后制成颗粒，干燥后喷入薄荷挥发油，最终制成500 g颗粒。5批样品的物理指纹图谱和化学特征图谱相似度均大于0.99，表明其物理化学性质高度一致。结论 本研究提出的方法操作简便，可行性高，不仅为逍遥颗粒的制剂开发提供了基础，也为其他类似制剂的研究提供了参考。

关键词：逍遥颗粒；正交试验；工艺优化；物理指纹图谱；化学特征图谱

逍遥颗粒作为《中国药典》（2020年版）一部收录的经典方剂，由柴胡、当归、白芍、炒白术、茯苓、炙甘草、薄荷和生姜八味药材组成。其功效主要为疏肝健脾、养血调经，适用于治疗因肝郁脾虚引起的情绪抑郁、胸胁胀痛、头晕目眩、食欲不振及月经不调等症状[1]。该方剂源自宋代《太平惠民和剂局方》中的逍遥散[2]，作为古代经典名方，以其药味简洁、疗效显著、适应症广泛、剂量轻巧及公众认知度高等特点著称。现代药理学研究进一步证实，逍遥颗粒在治疗抑郁症[3,4]、慢性乙型肝炎[5]、肝脾肿大[6]及乳腺增生症[7]等方面具有显著疗效。

作为已有国家标准的药品，逍遥颗粒的原制备工艺中缺乏关键参数，如浸泡时间、加水量、浓缩相对密度及辅料用量等，这对生产工艺的合理性、产品均一性及有效成分的一致性提出了挑战，同时也影响了产品的稳定性。基于中医药理论及现代药学研究，本研究采用综合评分法结合正交试验对水提工艺进行了深入探讨，并对制备工艺进行了优化。此外，还对产品质量进行了一致性评价，为逍遥颗粒的制剂开发提供了科学依据。

方法与结果

逍遥颗粒的提取工艺研究

芍药苷的含量检测方法

色谱条件

色谱柱：Ultimate XB-C18（4.6*250 mm，5 μm）。流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（13：87）。柱温：25 ℃。检测波长：230 nm。流速：1 mL/min。进样量：10 μL。

对照品溶液的配制

精密称量适量芍药苷对照品，用甲醇溶解并定容，配制浓度为32 μg/mL的对照品溶液，备用。

供试品溶液的配制

精密称量合并煎液约5 g，置于25 mL容量瓶中，加入适量50%甲醇溶液，超声处理（功率840 W，频率40 kHz）30分钟。待溶液冷却至室温后，用50%甲醇定容至刻度，摇匀后过滤，取续滤液作为供试品溶液。

干浸膏得率的检测

精密称量合并煎液约10 g，置于已恒重的蒸发皿中，准确称重。将蒸发皿置于水浴中加热至近干，随后在105 ℃条件下干燥6小时，冷却后称重，计算干浸膏得率。

正交试验

正交试验设计

文献研究表明，水提工艺的核心影响因素主要涉及提取时间、提取次数、溶剂用量以及浸提温度等参数。结合生产实际需求，本研究将煎煮时间、加水量和浸泡时间作为重点考察变量，并采用三水平正交实验设计，以系统优化工艺条件。正交试验过程

称取与处方量相当的生姜、柴胡、当归、白芍、炒白术、茯苓、炙甘草及薄荷八味饮片，平行制备9份样品，随机编号为1~9号。首先，按照标准方法提取薄荷挥发油，并将蒸馏后的水溶液单独收集备用。随后，将提取挥发油后的药渣与柴胡等七味药材按正交试验设计的方案进行煎煮实验。合并各次煎煮液并过滤，将滤液与薄荷蒸馏水溶液混合。最后，分别测定混合液中芍药苷的含量及干浸膏得率。

综合评分法的建立

本实验以芍药苷含量和干浸膏得率作为评价指标，并参考相关文献，分别赋予其权重系数。其中，芍药苷总含量（g）的权重系数设为0.5，干浸膏得率（%）的权重系数同样设为0.5。综合评分计算公式为：综合评分= 芍药苷总含量（g）× 0.5 + 干浸膏得率（%）× 0.5。

方差分析结果

根据表2- 2数据分析可知，各因素对实验结果的影响程度依次为B > A > C，其中最优提取条件为A2B2C2组合。为进一步验证结果的显著性，采用SPSS 21.0软件对表2- 2数据进行方差分析，具体结果见表2- 3。

表2- 3 方差分析结果（F0.05=19 F0.01=99） 

方差分析结果表明，在显著性水平α=0.05下，各因素对综合评分均未表现出显著影响（P > 0.05）。因此，本研究选择各因素较高水平的组合作为最优提取工艺条件，即浸泡30分钟后，先加水10倍量，煎煮2小时；再加水8倍量，煎煮1小时。

验证实验

根据正交实验优化筛选的工艺，通过3批提取来验证该工艺是否稳定。结果见表2- 4。

表2- 4 验证结果

三批验证实验的综合评分与比正交试验的任何一次都高，说明验证结果与试验结果基本一致，且RSD均小于2%，重现性较好。即逍遥颗粒的最优水提工艺为先加水10倍量，浸泡30分钟后，煎煮2小时；滤过，药渣加水8倍量，再煎煮1小时。

逍遥颗粒的成型工艺研究

颗粒的制备工艺

将两次煎液与蒸馏后的水溶液合并，浓缩至适宜体积后，加入适量糊精和2.5 g甜蜜素，充分混合均匀，制成颗粒并进行干燥处理。最后，将薄荷挥发油均匀喷洒至颗粒表面，混匀，制成500 g，完成制备，平行制备五批（编号S1~S5）。

成型率

参照2020年版《中国药典》逍遥颗粒项下的粒度检查法（双筛分法），以不能通过2号筛但能通过9号筛的颗粒和粉末总量不超过8.0%为标准。合格颗粒的成型率计算公式为：

若合格颗粒比例低于92%，则判定颗粒粒度不合格。

吸湿率

根据参考文献方法，将称量瓶置于装有NaCl过饱和溶液的玻璃干燥器中（相对湿度75%），在25℃条件下平衡24小时。取合格颗粒2 g（W1）置于扁称量瓶中（打开瓶盖），待质量恒定时称重（W2），吸湿率计算公式为：

水分

依据2020年版《中国药典》四部中的烘干法，取适量合格颗粒样品，测定其含水量。

辅料与水比例的筛选

在中药复方颗粒的制备过程中，首先测定流浸膏的固含量，然后按照不同比例将辅料与含水量混合均匀。具体步骤如下：将混合物制成软材，通过2号筛（24目）制粒，并在60℃条件下干燥4小时。干燥后，测定颗粒的吸湿率和成型率，并以这两项指标作为评价依据，筛选出最佳的辅料与水的比例。由于成型率和吸湿率对颗粒质量具有同等重要性，因此将两者的权重均设为0.5，并通过计算综合评分来确定最优比例。综合评分的计算公式为：

通过这一方法，可以科学地筛选出辅料与水的比例，从而优化颗粒的成型效果和稳定性。

表2- 5 辅料与水比例筛选结果

结果

由此可知，辅料与水比例在4.50~5.50之间时，颗粒制备工艺较优，辅料与水比例为5时，综合评分最高，故选其作为最优比例。在最优比例下，测定浸膏浓缩终点的相对密度为1.315（40 ℃），固含量为62.50%。最优制备工艺参数如下：

表2- 6 制备工艺参数表

验证试验

以最优辅料与水的比例制备三批样品，进行验证实验，结果见，由此可知，该方法稳定可靠。

  表2- 7 验证结果

物理指纹图谱建立

物理指标的确定

物理指标的确定如下表所示：

表2- 8 物理指标的确定

标准化转换

由于所测物性参数的数值和单位存在差异，为了便于直观比较，参考相关文献，将各参数归一化至0～10的统一区间。标准化转换方法及各物理质量指标的取值范围依据《中国药典》2020年版及相关文献数据确定，具体转换公式如表2- 9所示。

表2- 9 二级指标转换方法

化学特征图谱建立

方法学考察

供试品溶液制备

精密称定0.5 g逍遥颗粒，研磨成细粉，置于25 mL量瓶中。先加入20 mL 50%甲醇水溶液，再超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30分钟。待溶液冷却至室温后，用50%甲醇水溶液定容至刻度线。随后，使用PTFE滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液备用。

色谱条件

色谱柱为SHIMADZU shimnex CS C18 4.6×250mm，5 μm；流动相0.1%磷酸（A）-乙腈（B），梯度洗脱（0~10 min，95%~85%A；10~20 min，85%~65%A；20~30 min，65%~45%A；30~40 min，45%~15%A；40~50 min，15%~5%A；50~50.1 min，5%~95%A；50.1~60min ，95%A）；流速1.0 mL/min；柱温45 ℃；检测波长240 nm；进样量20 μL。

精密度试验

取同一份供试品溶液连续进样5次，以甘草酸铵（16号峰）为参比峰，计算各特征峰的相对峰面积和相对保留时间。结果见表2- 14，表明该方法精密度良好。

表2- 14 相对峰面积和相对保留时间结果

重复性试验

平行配制6份供试品溶液，采集图谱，以甘草酸铵（16号峰）为参比峰，计算各特征峰的相对峰面积和相对保留时间。结果见表2- 14，表明该方法重复性良好。

稳定性试验

取同一份供试品溶液室温下放置0 h、4 h、10 h、17 h和55.5 h进行进样检测，以甘草酸铵（16号峰）为参比峰，计算各特征峰的相对峰面积和相对保留时间。结果见表2- 14，表明供试品溶液在55.5小时内稳定性良好。

讨论

逍遥颗粒方中，白芍性凉而滋，味苦酸，微寒，具有养血柔肝的作用，而芍药苷作为方中白芍的主要活性成分具有抗自由基损伤，抑制细胞内钙超载和抗神经毒性等的作用，体内实验表明，芍药苷能够降低血液黏度、抑制血小板聚集、并扩张血管，与其他药材中的有效成分相比，芍药苷的稳定性更高，因此选择其作为逍遥颗粒质量评价的指标，能够更准确地反映颗粒的质量。本试验采用综合评分法，避免了单一指标的局限性，确保了分析结果的科学性和合理性。

在水提工艺中，浸泡时间、提取时间和加水量是关键因素，其交互作用对提取效果有显著影响，值得在生产中进一步优化，以提升颗粒质量。

《中国药典》2020版对逍遥颗粒的质量控制较为单一。本研究通过粉体学评价方法，构建了颗粒的物理指纹图谱和化学特征图谱，并进行了相似度分析。结果表明，逍遥颗粒的处方工艺稳定，质量均一，为后续制剂和质量控制提供了重要的参考依据。

参考文献

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