抗-M抗体对血型鉴定以及临床输血相容性检测的影响分析

摘要：目的：分析与研究抗-M抗体对血型鉴定及临床输血相容性检测的影响。方法：研究对象为2022年7月至2024年12月于我院输血科检查的56例O型红细胞对照管凝集标本，对患者进行血型鉴定和抗体检查，检测抗体类型和特异性，进一步分析M-抗体在不同温度条件下的效性。结果：通过检测结果可知，56例标本中正反定型不符50例（89.29%），正反定型相符6例（10.71%）；复核结果显示56例标本A、B、O细胞管均为阳性，对照管均为阴性；50例正反定型不符样本中抗-M抗体占比最高，共34例（68.00%）；抗-M抗体标本在不同温度下的效价有所差异，在4℃、22℃时表现为凝集梯度，在37℃时20例反应明显；34例抗-M抗体进行配血实验，献血者血型NN与盐水法配血相符，血型MM、MN与盐水法、凝集胺法和IAT法均不符合。结论：抗-M抗体对血型鉴定有直接影响，临床应采取有效的技术方法消除不规则抗体的影响，确保检测结果的准确性。

关键词：血型鉴定；临床输血；抗-M抗体；相容性检测

血型鉴定是保障输血安全、有效的重要步骤。随着医学技术的进步，人们对血型系统的认识日益深入，血型鉴定的准确性和全面性是临床输血工作的重要基础[1]。ABO血型系统和rH血型系统是常用的两种血型系统，但是除此之外也存在诸多其他血型系统，如MNS血型系统等，这些系统中的抗体可能对血型鉴定产生干扰。抗-M抗体是MNS血型系统的主要抗体之一，其存在可能导致ABO正反定型不一致或交叉配血不配合，从而对临床输血带来一定的安全隐患[2]。抗-M抗体在机体中的形成机制复杂，虽然通常认为其是自然发生的抗体，但也有研究显示，抗-M可因输血或感染病原菌而产生，特别是在儿童等特定人群中容易出现[3]。另外，抗-M的活性容易受温度影响，多数抗体在低于37℃的温度下发生反应，理想温度为4℃，但也有部分抗体在37℃下也可以凝集红细胞[4]。这一温度依赖性的特性导致抗-M抗体在血型鉴定和交叉配血试验中的表现复杂。因此，深入分析抗-M抗体对血型鉴定的影响，对于提高输血安全性、降低输血风险具有重要意义。本研究重点分析抗-M抗体对血型鉴定及临床输血相容性检测的影响，通过收集与分析临床输血科的血型鉴定和交叉配血试验数据，为临床输血提供准确、可靠的依据。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

研究对象为2022年7月至2024年12月于我院输血科检查的56例O型红细胞对照管凝集标本，其中男30例，女26例；年龄18～75岁，平均（55.72±10.16）岁。检查原因：术前检查32例，正常体检8例，孕前检查6例，孕期检查5例，血小板减少5例。

纳入标准：（1）患者年龄≥18岁；（2）均需要输血，标本未出现溶血反应；（3）资料完整。排除标准：（1）合并严重器质性病症；（2）合并血液系统、免疫系统病症。

1.2 方法

1.2.1 仪器及试剂

  设备包括KA2200血清学专用离心机、TD-5M型台式低速离心机、恒温水浴箱等；试剂包括抗-A、抗-B、抗-D、抗-M和抗-N血型试剂、IgG等抗人球蛋白试剂、凝聚胺配血试剂等；其他包括血型试剂卡、抗体鉴定细胞等。

1.2.2 血型鉴定

在室温环境下，针对ABO和RhD的血型鉴定，主要使用全自动微柱凝胶卡法和手工试管法。严格按照说明书要求进行规范操作，手工试管法应确保正反定型操作规范。

1.2.3 抗人球蛋白试验

（1）DAT试管法。按照1:1的比例，将浓度5%三洗红细胞和抗人球蛋白试剂混合，对样本进行检测，根据结果展开后续实验。（2）盐水间接抗球蛋白试验（IAT）。离心处理，获取血清，按照2:1的比例，与5%三洗红细胞、抗体筛选细胞混合，之后离心处理，分析结果。（3）凝聚胺法。按照2:1 的比例，将离心后血清和三洗红细胞、抗体筛选细胞分别混合，将0.6mL低离子液滴入混合液，均匀混合后放入凝聚胺，对混合液行离心处理，去上清后观察是否存在凝集，再次加入悬浮液，混合后1m内观察是否存在凝集。（4）手工卡式法。对5%三洗红细胞、抗体筛选细胞进行稀释，得到0.8%浓液，标记后放入50μL Coombs卡和25μL2-Me灭活血清，取得液体后，放入37℃恒温水浴箱中，15min后离心处理，分析结果。（5）抗体鉴定。与盐水法、凝聚胺法等流程一致，采用抗体鉴定细胞代替抗体筛选细胞。

1.2.4 放散实验

（1）热放散实验。将DAT（直接抗人球蛋白试验）阳性的压积红细胞进行四次洗涤后，与生理盐水以1∶1的比例混合。将混合液置于56℃的恒温水浴箱中进行抗体放散处理，持续时间设定为10分钟。处理完毕后，进行离心操作，并收集放散液。（2）酸放散实验。严格按照说明书要求进行规范操作，离心后，对放散液采用间接抗人球蛋白实验。

1.2.5 吸收实验

选择阳性O型压积细胞，按照1:1的比例，将其和完成离心处理的标本混合，在4℃冰箱内放入混合液保存，时间1h，之后进行离心处理，选择上清液，进行ABO反定型检测。

1.2.6 抗-M抗体效价检测

使用盐水法进行检测，采集3mL抗凝静脉血样本，并进行离心处理以分离出血清。使用生理盐水对血清进行倍比稀释（每次取100μL血清进行稀释）。稀释后，血清与含有5%O型健康人M抗原阳性的红细胞悬液按照预定比例进行混合。将混合液置于不同环境温度条件下，并观察记录其反应结果。

1.2.7 交叉配血

准备患者血清和献血者血清，以及经过三次洗涤的5%红细胞悬液。然后，按照2∶1的比例将患者血清与5%三洗红细胞、献血者血清与5%三洗红细胞分别进行交叉混合。主要采用盐水法、凝聚胺法和手工卡式法，与以上流程一致。

2. 结果

2.1 血型鉴定结果

56例标本中正反定型不符50例（89.29%），正反定型相符6例（10.71%）；复核结果显示56例标本A、B、O细胞管均为阳性，对照管均为阴性。见表1、表2。

表1 全自动血型仪微柱凝胶卡检测结果

表2 反定型试管法检测结果

2.2 影响血型鉴定的不规则抗体检测结果

50例正反定型不符样本中抗-M抗体占比最高，共34例（68.00%）。见表3。

表3 影响血型鉴定不规则抗体检测结果

2.3 抗-M抗体不同温度下效价结果

34例抗-M抗体标本在不同温度下的效价有所差异，在4℃、22℃时表现为凝集梯度，在37℃时20例反应明显。见表4。

表4 不同温度下抗-M抗体效价结果

2.4交叉配血试验结果

34例抗-M抗体进行配血实验，献血者血型NN与盐水法配血相符，血型MM、MN与盐水法、凝集胺法和IAT法均不符合。

3. 讨论

血型鉴定是输血前的重要工作内容，对于确保输血安全具有重要意义。不同血型之间的血液成分差异明显，如果输入错误类型的血液，会引发溶血反应等严重的输血反应，可能危及生命。而ABO血型鉴定可能受其他诸多因素影响，影响检测结果，从而威胁到输血安全。特别是对孕产妇以及有输血史、妊娠史的患者而言，进行不规则抗体检查具有重要意义。其中抗-M抗体为主要不规则抗体，其通常以IgM形式存在。研究显示，抗-M抗体在37℃环境下无活性，在4℃环境下活性最强，所以在输血中不具有临床意义[5]。但是该类抗体在抗人球蛋白试验及室温条件下均表现阳性，如果未进行检测，容易引发溶血反应等不良情况，严重威胁患者的健康安全。

本研究重点分析抗-M抗体对血型鉴定的影响，结果显示抗-M抗体对血型鉴定有直接影响，与其他相关研究结果一致[6]。进一步验证输血前进行血型鉴定的重要性与必要性。结果显示，56例标本中多数为正反定型不符，6例为相符，分析原因，6例符合的标本只通过微柱凝胶卡测定，不存在盐水类不规则抗体，且反定型的O细胞检测并非常规检测项目，所以可能导致漏检。同时，不同环境条件下抗体的表现有所差异，需要结合患者的具体情况，做好管理工作，制定科学、合理的检测计划。不同温度下抗-M抗体的效价有所不同，结果显示在4℃、22℃时表现为凝集梯度，在37℃时20例反应明显。原因在于抗-M抗体在诱导低温条件下相对特殊，致病性和热振幅强具有关联性，随着热振幅的升高，溶血发生风险也会增加，并且在低温环境中抗-M抗体的检出率高，所以在检测过程中需要避免冷抗体的激活[7]。如果出现正反定型不同的情况，需要重新采集标本，以保障结果的准确性，从而提高检测水平，最大限度减少人为等因素的干扰。在临床输血相容性检测中，交叉配血试验是核心环节。它通过将供者的红细胞与受者的血清进行混合，观察有无凝集或溶血现象，从而判断供者血液与受者血液是否相容。但是抗-M抗体的存在可能干扰交叉配血试验的结果，导致假阳性或假阴性的出现。这不仅增加输血的风险，还可能影响输血治疗的疗效。本研究中交叉配血试验结果显示，针对存在抗-M抗体的情况下，NN型献血者血液与受血者相容性较好，而MM或MN型则存在不相容性，需进一步谨慎评估输血风险。相关研究显示，针对临床、血站等血型检测，应用O细胞对照管有助于提高盐水法对不规则抗体的检出率[8]。而在具体输血过程中，不同条件下抗-M抗体的表现存在明显差异，需要结合患者情况制定针对性的管理计划，以明确抗体的临床意义，如通过全面的抗体滴定、抗体类型检测、热振幅测定等。针对移植评估而言，需要对供体进行交叉匹配，做好抗体筛选工作，以了解其具体水平，提高移植效果。总之，因为抗-M类抗体具有特殊性，预先明确机体存在抗-M类抗体，能够为疾病的诊治、献血者的选择提供可靠依据。

综上所述，抗-M抗体对血型鉴定有直接影响，临床应采取有效的技术方法消除不规则抗体的影响，确保检测结果的准确性。

参考文献：

[1]邓卫宁,李景源.毛细管超速离心法在临床输血无效患者血型鉴定中的应用价值[J].医学临床研究,2023,40(4):618-620.

[2]范雪明,林建,李丽红.微柱凝胶免疫检测技术在临床血型鉴定与输血中的应用分析[J].中国卫生标准管理,2023,14(11):161-165.

[3]王翠碧,陈玮媛,熊磊群,等.高效价抗-M抗体急诊输血的策略探讨——附1例交叉配血不合病例报告[J].实用检验医师杂志,2022,14(2):208-211.

[4] 魏典典,曹丛雪,李帅.抗-M抗体对血型鉴定、输血相容性检测及临床输血的影响[J].深圳中西医结合杂志,2023,33(14):73-76.

[5]黎子辉,李俏艺,麦贤昌. 基于临床输血前血型鉴定及抗体筛查对输血安全的影响分析[J].临床检验杂志（电子版）,2020,9(2):10-11.

[6]严洁婷,丁梦圆,许学明,等.抗-M抗体检测方式及临床意义研究[J].交通医学,2021,35(4):389-391,394.

[7]陈敏洁,曹锁春,许飞,等.抗-Ec合并抗-M抗体致疑难配血实验分析[J]. 检验医学与临床,2020,17(3):430-432.

[8]许亚莉,刘孟,张瑞宁,等.高效价抗-M抗体对血型鉴定的影响及解决策略[J].临床血液学杂志,2021,34(12):878-881.

作者简介：赵唯（1995年02月）；男；汉族；云南保山人；本科；主管技师；主要从事临床检验、输血工作。

通讯作者：李巧明（1980年11月）；女；汉族；云南保山人；本科；主管技师；主要从事临床检验、输血工作。