荧光标记法结合接触平皿法在ICU环境清洁消毒质量评价中的效用

【摘要】目的：通过在重症监护病房（ICU）中使用荧光标记法和接触平皿法进行环境卫生学监测，以评价两种监测方法的效用。方法：选择某三级综合医院7个ICU比较干预前后高频接触环境物体表面荧光标记结果，并将荧光标记法结果与接触平皿法微生物检测结果进行比较。结果：荧光标记法干预前7个ICU共布点315个，清除率为47.94%，干预后共布点504个，清除率为78.17%，差异有统计学意义(χ2=79.61，P＜0.05）。ICU高频接触环境物体表面（床栏杆、床头柜、输液架、设备条带、医疗废物桶）荧光标记法清除率干预前为50.29%，干预后上升至78.21%，差异有统计学意义(χ2=38.27，P＜0.05）；干预前ICU设备条带清除率最低，为25.71%，干预后设备条带清除率上升75%，差异具有统计学意义(χ2=21.23，P＜0.05）。干预后ICU治疗室台面接触平皿法合格率为71.42%，低于荧光标记法的94.64%，差异有统计学意义(χ2=4.589，P＜0.05）。结论：荧光标记法和接触平皿法在ICU环境卫生学监测中的结果存在差异，荧光标记法只能作为判断环境清洁消毒效果的定性检测工具，需要结合接触平皿法进行定量检测，评价结果才更加准确。

【关键词】荧光标记法；接触平皿法；ICU；高频接触物体表面；环境清洁消毒

多重耐药菌在患者之间的传播已经成为医院感染暴发的主要来源，重症监护病房（ICU）因床单元拥挤，侵入性操作多，抗生素使用频繁时而发生院感暴发[1]。多项研究显示ICU的院感暴发与不清洁的环境相关[2]，ICU环境清洁的质量对防止医院感染暴发有着至关重要的意义。目前多数医疗机构采用棉拭子采样微生物培养法来评价环境表面清洁效果，但此种方法工序繁琐，耗时长。本研究采用了荧光标记法结合接触平皿法对ICU环境表面清洁效果进行干预前和干预后效果评价。现具体报道如下：

1资料与方法

1.1研究对象

选取某院7个ICU护理单元中高频接触的环境物体表面即床栏杆、输液架、床头柜、设备带、护士工作站鼠标、医生工作站鼠标、盥洗室门把手、医疗废物桶表面、治疗室表面等9个部位作为环境卫生学监测对象。

1.2研究方法

1.2.1基线调查首先在无干预的情况下对ICU环境清洁效果进行基线调查。在ICU工作人员不知情的前提下，院感科专职人员每天对7个ICU的监1床周边9个部位进行荧光标记法监测。

1.2.2培训与考核以基线调查的结果为依据，院感科先对ICU保洁主管进行培训，内容涵盖含氯消毒液的配置、手卫生、保洁工具的分区使用、床单元的擦拭消毒顺序和保洁工具的终末处理方法等，然后由保洁主管按照院感科所制定的ICU床单位清洁消毒标准操作规程（SOP）对所管辖ICU的保洁人员进行为期一周的同质化培训，最后由院感专职人员赴7个ICU现场对保洁人员进行ICU床单位清洁消毒操作考核，确保人人过关。

监测与评价以基线调查结果为依据，在干预措施实施后对ICU高频接触环境物体表面进行荧光标记法和接触平皿法环境卫生学监测。院感科专职人员随机对7个ICU中任意一床位9个部位进行荧光标记法监测，计算清除率；同时，对7个ICU中任意一床位高频接触物体表面采用1次接触平皿法监测，计算单位面积细菌菌落数（CFU/cm2）。

1.3环境卫生学监测方法

1.3.1荧光标记法荧光标记笔和荧光手电筒均由费洛朗公司生产。用荧光笔划“☆”在物体表面进行标记，24小时后用荧光手电筒检查标记是否清除。“☆”记号消失则为清除，“☆”记号存在则为未清除，计算清除率（%）。

1.3.2接触平皿法接触平皿为南通凯恒生物科技有限公司生产。每个监测点采用2块面积为25cm2接触平皿，取下皿盖将培养基按压到采样物体表面，按压15秒后将皿拿起盖好皿盖，随后置于（36±1）℃恒温培养箱培养48小时，计算单位面积细菌菌落数（CFU/cm2）。

1.3.2结果计算清除率（%）=清除点数/标记点数 ×100%；细菌菌落数（CFU/cm2）=两个平皿合计菌落数/50cm2，ICU环境物体表面菌落数标准参照GB-15982《医院消毒卫生标准》：≤5.0CFU/cm2，判定为合格。

1.4统计软件

应用SPSS25.0软件对数据进行统计分析，干预前后荧光标记法清除率的比较和荧光标记法与接触平皿法监测合格率的比较均采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1荧光标记法干预效果

基线调查总共布点315个，总体清除率为47.94%。在实施干预策略后进行第二次荧光标记法监测，共布

点504个，总体清除率为78.17%，差异有统计学意义(χ2=79.61，P＜0.05），见表1。

2.2不同物体表面荧光标记法干预效果

干预前ICU设备条带清除率最低，为25.71%，干预后设备条带清除率上升75%，差异具有统计学意义(χ2=21.23，P＜0.05），见表2。

2.3干预后两种监测方法合格率比较

接触平皿法对物体表面消毒效果进行监测，ICU治疗室台面接触平皿法监测合格率为71.43%，低于荧光标记法监测的合格率94.64%，差异有统计学意义(χ2=4.589，P＜0.05），见表3。

表 1  干预前后7个 ICU荧光标记法清除率（% ）比较

表2  干预前后高频接触物体表面荧光标记法清除率

（% ）比较

表3  干预后接触平皿法与荧光标记法在 ICU高频接触

物表的监测合格率（% ）比较

3讨论

医院环境清洁在医院感染传播中起着至关重要的作用，因此环境卫生在任何传染病预防和控制计划中都

起着关键性作用。医院里一些高频接触的物体表面经常被患者和医院工作人员的手污染，他们是危险的多重耐药菌的潜在宿主，这些病原体很容易通过医院工作人员的手传染给患者。耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、艰难梭菌、耐万古霉素肠球菌、诺如病毒以及多耐药的肠杆菌科、不动杆菌和铜绿假单胞菌是引起院内感染的主要病原体，他们在高频接触的物体表面有着较强的生存能力，只有通过清洁才能去除这些病原体[4]。研究显示，发生在重症监护病房感染的患者大约是普通病房的2-5倍，它的传播依赖于很多因素，其中清洁是一个重要的因素[5]。重症监护病房是医院感染暴发的重灾区，在设备表面，工作人员高频接触表面，例如电脑键盘、鼠标等均检出了与患者感染相关多重耐药菌且高度同源，45.65%暴发事件和污染的床头柜有关，24.64%暴发事件和不清洁的床栏杆相关，因此环境表面的清洁至关重要，它是控制医院感染和医院感染暴发发生的重要措施之一。

2016年颁布的《重症监护病房医院感染预防与控制规范》中规定每季度应对ICU物体表面进行消毒效果监测，《医疗机构环境表面清洁与消毒管理规范》中也指出了环境清洁卫生审核方法可采用目测法、荧光标记法、荧光粉迹法、ATP法和微生物法。目测法是通过检查人员的眼睛来判断物体表面的清洁状况，受主观因素影响较大，不能作为评价环境卫生的常规方法，ATP检测方法因试剂成本太高，在日常工作中也较少作为检查方法。微生物法往往采用棉拭子采样法，专职人员采样是在ICU保洁人员对某个物体表面进行擦拭消毒后立即进行，只能体现单个物体表面实时的清洁质量，而不能客观反映ICU整体的清洁质量，无法作为ICU日常清洁效果的衡量标准。荧光标记法省时省力，成本低廉，已经作为日常考核环境清洁效果的工具，接触平皿法采样流程简单，使用方便，不受拭子的材质、制作方式和拭子湿度所影响[9]，也省去了平皿接种这一流程，同样也能对环境物表进行微生物监测。

荧光标记法是有计划地标记在尚未清洁的消毒物品表面、环境表面以指示是否被清洁人员有效清除，计算有效的荧光标记清除率，考核环境清洁质量[6]。本研究首先采用荧光标记法对ICU环境清洁效果进行基线调查，总体清除率为47.94%，与哈佛医学院附属布莱根妇女医院ICU荧光清除率44%一致[8]。由于ICU住院患者较多，病情较重，多重耐药菌患者检出较多，隔离单间少，每一位多重耐药菌患者做到单间隔离措施比较困难，因此手卫生和环境清洁不到位是导致清除率低的主要原因。ICU的环境清洁基本是由保洁人员来完成，医院保洁人员基本都为第三方社会化服务人员，文化水平参差不齐，服务人员频繁地流动和更换以及没有一个良好的考核方法是导致ICU环境清洁效果较低的根本。

原因。他们所做的工作不仅仅是让ICU看起来更加干净整洁，清除物体表面的病原体才是工作中的重中之重。研究还发现设备条带清除率最低为25.71%，经调研发现保洁人员认为设备条带日常工作中触碰频率较少且周围会放置呼吸机、心电监护等仪器设备，擦拭较为困难。针对上述结果对保洁人员开展床单元消毒流程培训和考核后再次进行荧光标记，总体清洁率上升至78.17%，与Carling研究[7]结果一致，设备条带清除率上升至75%，差异具有统计学意义。证实了荧光标记法能提升环境表面清洁率，对于指导和教育保洁员是非常有力的措施，可以有效预防及控制因接触不清洁的床单元表面而引起的院内感染[10]。荧光标记法是通过荧光标记的擦除来判断环境清洁效果，荧光标记只能证明某个点位被清除，无法知晓消毒液配比的正确性和整个物体表面擦拭的完整性，因此在干预后又采用了接触平皿法对ICU高频接触物体表面进行微生物监测，治疗室台面用接触平皿法合格率为71.42%，低于荧光标记法的清除率94.64%，差异有统计学意义。治疗室是进行静脉输液配置的区域，护士在进行操作时往往会选择最方便的一块区域进行，也只对这一块区域进行消毒，在进行荧光标记时，专职人员也仅仅在这一区域进行标记所以荧光清除率较高，接触平皿放置的区域具有随意性，超出了护士消毒的区域，可能会产生细菌超标的结果；物体表面清洁虽由护士完成但是洁具的清洗消毒却是由保洁人员进行，若平时没有良好的监管，无法知晓洁具是否每天按要求进行消毒加之手卫生依从性不到位，不清洁的双手在工作中触摸了台面，使得台面污染，导致了接触平皿法治疗室台面合格率低。

荧光标记法是一种有效的评价ICU环境清洁效果的方法，可以帮助医疗机构及时发现和解决清洁问题，保障患者的安全，它可以重复使用，可以对不同时间点的清洁效果进行比较，具有可视化功能，可以直观地展示清洁效果，操作简单，不需要复杂的设备和技术，可以在实际环境中进行。通过荧光标记法可以知晓ICU环境清洁的盲区，可以有的放矢对保洁人员开展培训。但荧光标记法只能作为日常专职人员判断环境清洁消毒效果的管理工具，仍不能代替微生物检验方法，无法判断物体表面的消毒效果，特别是发生疑似多重耐药菌院内感染暴发时，无法鉴别多重耐药菌的种类。对ICU环境清洁效果的评价可以用荧光标记法和接触平皿法相结合，定性、定量地分析消毒效果，使监测结果更加准确。

本研究也存在局限性，第一荧光标记点位有限，只选择了9个点位，并不能覆盖整个ICU，第二干预后只进行了一次接触平皿法的检测，样本量较少，并在研究过程中也发现荧光标记在较粗糙的物体表面难以擦拭去除，所以数据的准确性可能存在差异，第三无法通过

改善ICU物体表面清洁效果来证实对ICU医院感染的相关影响，因此需要进一步研究，来评价这两种方法的可持续性。

参考文献：

[1]Gu B，Bi R，Cao X，Qian H，Hu R，Ma P.Clonal dissemination ofKPC-2-producing Klebsiella pneumoniae ST11 and ST48 clone among multiple departments in a tertiary teaching hospital in Jiangsu Province，China[J].Annals of translational medicine，2019，7（23）:716

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[6]陶胜茹，杨涛，余广超，余浩辉.重症监护病房高频接触表面环境清洁卫生质量评价方法探讨[J].中国感染控制杂志，2021，20（6）:568-572

[7]Carling PC，Parry MM，Rupp M，Po J，Dick B，Von Beheren S.Improving cleaning of the environmental surrounding patients in 36 acute care hospitals[J].Infect Control Hospital Epidemiology，2008，29

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[8]Goodman ER，Platt R，Bass R，Onderdonk AB，Yokoe DS，Huang SS.Impact of an environmental cleaning intervention on the presence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus and vancomycin-resistant enterococci on surfaces in intensive care unit rooms.Infect Control Hosp Epidemiol.2008:29

（7）:593-599.

[9]王慧敏，金慧，陈冰冰，孔庆鑫，沈林海，曹阳.三种采样方法对医用织物表面微生物监测效果观察[J].中国消毒学杂志，2022，39（4）:245-247.

[10]胡慧芳，郭金凤，孔立，李玉森，王娟，刘宏.荧光标记法在评价及改进医院清洁质量中的应用[J].中华医院感染学杂志，2017，27（18）:4261-4264.

基金项目：江苏省医院协会医院管理创新专项研究课题 （JSYGY-3-2021-JZ33）

通讯作者：杨乐